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嘉峪檢測網 2021-09-17 22:37
在無菌醫療器械潔凈廠房的驗證中，靜態測試和動態測試一般都涉及懸浮粒子和微生物，采集取樣是其中必不可少的重要步驟。本文根據相關要求對如何在驗證中進行有效取樣及如何設計合理的取樣方法等問題進行了整理，供大家參考。
靜態測試時懸浮粒子、微生物取樣的設計
懸浮粒子
1. 取樣點數量
在GMP附錄1提出懸浮粒子測試方法可參照ISO14644-1。取樣點最小數量（NL）可以根據ISO14644-1中“表A.1-有關潔凈室區域的取樣點”進行設計。如果潔凈室面積小于2m2，可以選定額外的取樣點，同時考慮GB/T16292-2010的要求，每個潔凈室取樣點最小數量一般設計為不少于2個。
2. 取樣位置
潔凈室或潔凈區取樣點布置宜力求均勻，避免采樣點在局部區域過于稀疏，可以將整個潔凈室或潔凈區劃分為NL個等面積區塊，每個區塊都選定一個可代表該區塊特征的取樣點，取樣時采樣探頭置于工作活動的平面（一般在離地面0.8m~1.5m高度的水平面上）。對于存在非單向氣流的潔凈室或潔凈區，取樣點不應布置在直接位于非擴散空氣供應源之下。
3. 取樣量
可由公式Vs=(20/Cn )×1000確定。
公式中：VS代表取樣點的單次；最低取樣量，用升（L）表示；Cn代表相關等級規定的最大被考慮粒徑之等級限值（每立方米的粒子數量）；20代表粒子濃度處于該等級限值時，可被檢測到的粒子數。
示例
Cn=20pcs/m³，根據公式計算單次最低取樣量VS=(20/20)×1000=1000L；如使用粒子計數器的流量為100L/min，取樣時間不少于10min。
Cn=29pcs/m³，根據公式計算單次最低取樣量VS=690L。潔凈廠房驗證中可以按1000L采樣。
Cn=2900pcs/m³，根據公式計算單次最低取樣量VS=7L。如使用粒子計數器的流量為50L/min，取樣時間不少于1min。
注：取樣量至少為2L，取樣時間最少為1min；每個取樣點采樣次數可多于1次，且不同取樣點的采樣次數可以不同，每個潔凈區域一般滿足5次采樣。
浮 游 菌
1. 取樣點數量
參考懸浮粒子要求。
2. 取樣位置
參考懸浮粒子要求。
3. 取樣量
根據GB/T 16292-2010通常設計最小取樣量是A級1000L、B級1000L、C級500L、D級100L，每個取樣點一般采樣一次。
沉 降 菌
1. 取樣點數量
參考懸浮粒子要求。
2. 取樣位置
參考懸浮粒子要求。
3. 最少培養皿數，在滿足最小取樣點數量的同時還宜滿足最少培養皿數，單向氣流下通常不少于14個。
4. 每個取樣點一般采樣一次，同一位置可使用多個沉降碟連續進行監測并累積計數，每個位置的沉降碟至少暴露0.5小時，累計暴露時間為4小時。
動態測試時懸浮粒子、微生物取樣的設計
懸浮粒子
1、 取樣點數量
在GMP附錄1提出懸浮粒子測試方法可參照ISO14644-1。取樣點最小數量（NL）可以根據ISO14644-1中“表A.1-有關潔凈室區域的取樣點”進行設計。如果潔凈室面積小于2m2，可以選定額外的取樣點，同時考慮GB/T16292-2010的要求，每個潔凈室取樣點最小數量一般設計為不少于2個。
2、取樣位置
人員是對環境產生活性和非活性微粒的重要因素，通常選擇門口（人員流動較大）、操作臺面附近（生產活動多）、回風口附近（粒子濃度較大區域）、距回風口最遠角（容易形成氣流死角）等位置，同時應考慮選擇的取樣位置不能干擾潔凈環境或增加產品污染的風險。
3、取樣量
可由公式Vs=(20/Cn )×1000確定。
公式中：VS代表取樣點的單次；最低取樣量，用升（L）表示；Cn代表相關等級規定的最大被考慮粒徑之等級限值（每立方米的粒子數量）；20代表粒子濃度處于該等級限值時，可被檢測到的粒子數。
示例
Cn=20pcs/m³，根據公式計算單次最低取樣量VS=(20/20)×1000=1000L；如使用粒子計數器的流量為100L/min，取樣時間不少于10min。
Cn=29pcs/m³，根據公式計算單次最低取樣量VS=690L。潔凈廠房驗證中可以按1000L采樣。
Cn=2900pcs/m³，根據公式計算單次最低取樣量VS=7L。如使用粒子計數器的流量為50L/min，取樣時間不少于1min。
注：取樣量至少為2L，取樣時間最少為1min；每個取樣點采樣次數可多于1次，且不同取樣點的采樣次數可以不同，每個潔凈區域一般滿足5次采樣。
浮 游 菌
1、取樣點數量
參考懸浮粒子要求。
2、取樣位置
除參照“動態”懸浮粒子取樣位置確定要求外，同時應考慮微生物污染極有可能對產品質量造成不良影響及最有可能表現出實際生產過程中微生物擴散最嚴重的位置或者有助于污染蔓延的區域。
3、取樣量
參考“靜態”浮游菌測試要求。
沉 降 菌
1、取樣點數量
參考“動態”懸浮粒子取樣點數要求。
2、取樣位置
參考“動態”浮游菌取樣位置選擇要求。
3、最少培養皿數
參考“靜態”沉降菌測試要求。
4.每個取樣點一般采樣一次，同一位置可使用多個沉降碟連續進行監測并累積計數，每個位置的沉降碟累計暴露時間為4小時。
表面微生物
1、取樣點數量
依據表面微生物取樣位置評估結果確定。
2、取樣位置
通?？紤]每個生產環境與產品的接觸程度，很可能給產品帶來生物負荷的位置，包括最難接近或最難清潔、滅菌或消毒位置，設備表面，儲存容器，傳送帶，人員手套及墻壁、地面、門把手、椅子、測試儀器、傳遞窗、控制面版等位置；同時應考慮選擇的取樣位置不能干擾潔凈環境或增加產品污染的風險。
來源：Internet
