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嘉峪檢測網 2021-12-08 13:42
一、關于手動積分的指南
關于手動積分，并沒有指南給出明確的定義。筆者只查到有兩篇生物樣本分析的方法驗證指南規(guī)定了再積分（Reintegration）的注意事項。
FDA的2001年定稿指南 Bioanalytical Method Validation，及相應的2013年草案指南也有類似的要求。生物樣本分析的方法驗證2013草案指南，第III.C節(jié)“樣本數據再積分”規(guī)定：SOP應該確定再積分的標準，和怎樣進行再積分；應清楚描述、并記錄再積分的理由；應報告原始和再積分數據。第VII.D節(jié)還規(guī)定：再積分數據應有管理人員授權再積分。
EMA的2011年指南 Guideline on bioanalytical method validation，第5.5節(jié)規(guī)定：應該有SOP描述色譜的積分和再積分。應在分析報告中討論偏離這個SOP的任何偏差。應該記錄色譜積分、再積分的積分參數、初始積分數據、最終積分數據，并在要求時立即可得。
二、什么情況下可以進行手動積分？
1）低分離度或低響應；
2）流動相不穩(wěn)定，基線紊亂，保留時間變化小；
3）運行過程中，出現異常峰；
4）軟件積分的局限性，如由于軟件參數閾值的設置導致峰未積分，峰起點和終點間出現肩峰和異常的基線漂移，軟件錯誤（峰未積分和錯誤識別峰）；
5）由于樣品母體的干擾導致的復雜色譜圖：裂峰、目標雜質的同時洗脫/肩峰、基線噪音、負峰、基線上升或下降（由于某些梯度程序）、峰的嚴重拖尾、烴類的存在導致自動積分不正確。
三、手動積分的權限及操作
操作員在數據系統(tǒng)自動積分不正確時，領取手動積分處理報告表并填寫，手動積分申請被QC經理批準后由QC經理或QC組長（若有）或其指定人員（一般是指經驗豐富的資深QC）方可進行手動積分。
四、手動積分注意事項
1）手動積分不能試圖通過以下動作來使數據符合標準要求：減少峰（減少峰面積）；增加峰（增加峰面積）；改變峰高；
2）同一次檢驗的所有標準品、工作對照品、樣品等必須使用同一方法進行手動積分。
3）手動積分結束后，應打印自動積分圖譜和手動積分圖譜附于手動積分申請表之后，提交QC經理審核；QC經理應復核完整的數據找出根因，基于根因制定相應的CAPA措施來避免類似事件。
4）自動積分的圖譜不得刪除或被覆蓋，應與手動積分圖譜一起保存于計算機中；打印的自動積分圖譜和手動積分圖譜應標識清楚簽名，隨同手動積分申請表附于檢驗原始記錄后面一起交質量管理部經理、QP審核無問題后歸檔。
通常，在得到自動積分色譜圖后，分析保留時間、峰型是否如預期，峰是否被正確識別，基線是否滿足要求，或者其它標準。只有在色譜圖不可接受時，才可考慮是否可以進行手動積分，或者進行實驗室調查。
有兩種情況，是禁止進行手動積分的：
在自動積分后，對稱的峰有可接受的基線；
增強峰、或削減峰的目的是為了滿足系統(tǒng)適用性接受標準，或滿足放行質量標準。
總之，企業(yè)應建立科學、合理、透明的自動積分操作規(guī)程，并滿足數據完整性的要求。在SOP之外進行的手動積分可能被視為數據造假。
五、色譜軟件選型、權限設置和結果顯示
滿足合規(guī)要求的色譜軟件（例如Waters和Angilent的軟件），能夠分別設置不同權限，例如普通化驗員不具備進行手動積分的權限，需要主管進行操作，有些軟件則不具備這些功能；即使是同一個品牌的軟件，也有不同版本；即使軟件有這個功能，企業(yè)也不一定啟用。
有兩個信息是否顯示，對色譜數據透明度非常重要：方法名稱和數據版本。如果企業(yè)不使用手動積分（重畫基線），而采用修改參數的方式，則每修改一次，是不同的方法（規(guī)范的管理程序會要求更改方法名稱保存，否則就只能到審計追蹤才能查出來這個方法已經被修改了），而打印的色譜圖可以選擇是否顯示方法；每處理一次數據，會形成一個數據版本，同樣的，打印的色譜圖可以選擇是否顯示數據版本。
一個完全透明的結果顯示，會在打印的色譜圖上顯示“方法名稱+數據版本”（同時要求修改參數則改變方法名稱，不需要QA或檢查員仔細檢查審計追蹤才能發(fā)現修改痕跡）。
來源：Internet
