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1 β-葡萄糖苷酶的介紹 β-葡萄糖苷酶,其英文名為β-glucosidase,屬于水解酶類(lèi),又稱(chēng)β-D-葡萄糖苷水解酶,別名龍膽二糖酶,纖維二糖酶和苦杏仁苷酶,是纖維素分解酶系中重要組成成分之一。它屬于纖維素酶類(lèi),能催化水解芳烴與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖。 根據(jù)其第五特異性將β-葡萄糖苷酶歸類(lèi)于烴基-β-葡萄糖苷酶,纖維二糖酶或水解烴基-β-糖基和...查看詳情>>
1 β-葡萄糖苷酶的介紹
β-葡萄糖苷酶,其英文名為β-glucosidase,屬于水解酶類(lèi),又稱(chēng)β-D-葡萄糖苷水解酶,別名龍膽二糖酶,纖維二糖酶和苦杏仁苷酶,是纖維素分解酶系中重要組成成分之一。它屬于纖維素酶類(lèi),能催化水解芳烴與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖。
根據(jù)其第五特異性將β-葡萄糖苷酶歸類(lèi)于烴基-β-葡萄糖苷酶,纖維二糖酶或水解烴基-β-糖基和寡聚體的酶類(lèi)。又據(jù)β-葡萄糖苷酶基因系列的不同有β-葡萄糖苷酶A和β-葡萄糖苷酶B之分。兩者盡管同屬β-葡萄糖苷酶,但其第五特異性卻不盡相同。相對(duì)分子質(zhì)量一般在40000-300000之間。
2 適用范圍
典型的葡萄糖風(fēng)味主要源于葡萄中的揮發(fā)性化合物,然而葡萄漿果中存在游離態(tài)和結(jié)合態(tài)兩大類(lèi)呈香物質(zhì)。游離態(tài)呈香物質(zhì)可以直接從葡萄酒中揮發(fā)出來(lái),使人產(chǎn)生嗅覺(jué)翻譯。結(jié)合態(tài)呈香物質(zhì)沒(méi)有香氣,必須經(jīng)過(guò)分解釋放出游離態(tài)呈香物質(zhì)才能產(chǎn)生香氣,必須經(jīng)過(guò)分解釋放出游離態(tài)呈香物質(zhì)才能產(chǎn)生香氣,因此結(jié)合態(tài)呈香物質(zhì)又被稱(chēng)為風(fēng)味前體物質(zhì)。通常,以結(jié)合態(tài)形式存在的風(fēng)味前提物質(zhì)的含量比那些游離態(tài)的呈香物質(zhì)要豐富得多。
由于大部分呈香物質(zhì)是以糖苷的結(jié)合態(tài)形式存在的,沒(méi)有芳香氣味,所以為了增強(qiáng)和改善葡萄酒的香氣,必須將葡萄中的這些結(jié)合態(tài)呈香物質(zhì)分解,釋放出游離態(tài)的呈香物質(zhì)。
3 測(cè)量方法
β-葡萄糖苷酶活性的測(cè)定方法
目前對(duì)于β-葡萄糖苷酶活性的測(cè)定方法很多,概括起來(lái)主要有電化法,熒光法,分光光度法等.
1)Barush和Swiain法,也就是分光光度法:它以水楊苷做底物,將水楊苷裂解為水楊醇和葡萄糖,然后將酶解產(chǎn)物中的水楊醇用4-氨基安替比林顯色,再用分光光度法比色測(cè)定;也可用熊果苷作為底物,對(duì)產(chǎn)生的葡萄糖可用碘量法加以測(cè)定。
2)熒光法;用4-甲基傘形酮β-D-葡萄糖苷作為底物,經(jīng)β-葡萄糖苷酶作用,專(zhuān)一地分解為4-甲基傘形酮,利用傘形酮與4-甲基傘形酮具強(qiáng)烈熒光特點(diǎn),通過(guò)測(cè)定酶解有力出的4-甲基傘形酮的熒光的特點(diǎn),通過(guò)測(cè)定酶解游離出的4-甲基傘形酮的熒光吸光度計(jì)算酶的活性。
3)比色法,以對(duì)小雞苯基β-D-葡萄糖苷作為底物進(jìn)行酶解,底物水解后釋放出來(lái)的對(duì)硝基苯酚在400-420nm可見(jiàn)光范圍內(nèi)有特征吸收峰,可直接在400-420nm之間比色測(cè)定。
4)梁華正等人研究了以京尼平苷為底物檢測(cè)β—葡萄糖苷酶活性的一種新方法。京尼平苷經(jīng)β-葡萄糖苷酶水解后產(chǎn)生京尼平,京尼平能與氨基酸反應(yīng)生成穩(wěn)定的藍(lán)色,在590nm處有特征吸收峰。β-葡萄糖苷酶活力在0.0-1U/ml范圍里呈線型關(guān)系,最低檢出限為0.02U/ml。
另外還有電化法,該方法是以扁桃苷作為底物,根據(jù)所產(chǎn)生的氫化物,用于自發(fā)(內(nèi))電解池相聯(lián)結(jié)的一對(duì)銀-鉑電極的方法來(lái)測(cè)定其β-葡萄糖苷酶活性。
以水楊苷酶反應(yīng)底物的Barush和Swiain法檢測(cè)的是經(jīng)β-葡萄糖苷酶水解底物產(chǎn)生的極微量的葡萄糖,反應(yīng)易受干擾,且檢測(cè)靈敏度不高。熒光法最初用于酶含量低的高等動(dòng)物組織中的β葡萄糖苷酶的檢測(cè),靈敏度高且快速,但是由于實(shí)驗(yàn)過(guò)程操作復(fù)雜,且重復(fù)性不好,現(xiàn)在應(yīng)用不多。以對(duì)硝基本機(jī)-β-D葡萄糖苷為酶底物的比色法最為普遍,且在實(shí)驗(yàn)中該方法操作簡(jiǎn)單,快速,靈敏度高重現(xiàn)性好。以京尼平苷為底物檢測(cè)β-葡萄糖苷酶活性的方法與pNPG法相比,靈敏度低,但是精密度和準(zhǔn)確度較好,結(jié)果穩(wěn)定。
參考文獻(xiàn):李華.高麗 β-葡萄糖苷酶活性測(cè)定方法的研究[N].食品與生物技術(shù)學(xué)報(bào).2007年3月(第26卷第2期)
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檢測(cè)項(xiàng):總活性物含量 檢測(cè)樣品:手洗餐具用洗滌劑 標(biāo)準(zhǔn):手洗餐具用洗滌劑 GB 9985-2000
檢測(cè)項(xiàng):總活性物 檢測(cè)樣品:洗手液 標(biāo)準(zhǔn):洗手液 QB/T2654-2004
機(jī)構(gòu)所在地:山東省青島市
檢測(cè)項(xiàng):水不溶物含量 檢測(cè)樣品:表面活性劑 標(biāo)準(zhǔn):表面及界面張力測(cè)定方法SY/T 5370-1999
檢測(cè)項(xiàng):特性粘數(shù) 檢測(cè)樣品:表面活性劑 標(biāo)準(zhǔn):表面及界面張力測(cè)定方法SY/T 5370-1999
檢測(cè)項(xiàng):水解度 檢測(cè)樣品:表面活性劑 標(biāo)準(zhǔn):表面及界面張力測(cè)定方法SY/T 5370-1999
機(jī)構(gòu)所在地:天津市
檢測(cè)項(xiàng):活性組分 檢測(cè)樣品:水處理劑 羥基亞乙基二膦酸二鈉 標(biāo)準(zhǔn):重量法《水處理劑 羥基亞乙基二膦酸二鈉》HG/T 2839-2010(4.1)
機(jī)構(gòu)所在地:天津市
檢測(cè)項(xiàng):鹽酸不溶物 檢測(cè)樣品:活性磷酸鈣 標(biāo)準(zhǔn):活性磷酸鈣 HG/T3583-2009
檢測(cè)項(xiàng):篩余物 檢測(cè)樣品:活性磷酸鈣 標(biāo)準(zhǔn):普通工業(yè)沉淀碳酸鈣 HG/T2226-2010
機(jī)構(gòu)所在地:四川省自貢市
檢測(cè)項(xiàng):總活性物 檢測(cè)樣品:潤(rùn)膚乳液 標(biāo)準(zhǔn):表面活性劑和洗滌劑 陰離子活性物的測(cè)定 直接兩相滴定法 GB/T 5173-1995
檢測(cè)項(xiàng):總五氧化二磷 檢測(cè)樣品:潤(rùn)膚乳液 標(biāo)準(zhǔn):表面活性劑 洗滌劑試驗(yàn)方法 GB/T 13173-2008
機(jī)構(gòu)所在地:廣東省廣州市
機(jī)構(gòu)所在地:山東省青島市
機(jī)構(gòu)所在地:天津市
檢測(cè)項(xiàng):總活性物 檢測(cè)樣品:日用消費(fèi)品 標(biāo)準(zhǔn):表面活性劑 洗滌劑試驗(yàn)方法 GB/T 13173-2008
機(jī)構(gòu)所在地:廣東省深圳市
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