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大家好，今天想和大家聊一聊“卵母細(xì)胞體外成熟（IVM）技術(shù)”。

卵母細(xì)胞體外成熟，顧名思義，就是讓卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)的環(huán)境中從未成熟狀態(tài)變?yōu)槌墒鞝顟B(tài)。

那么卵母細(xì)胞在卵巢里好好的，為什么要把它們拿出來(lái)再研究？以及這個(gè)體外成熟過(guò)程是怎么樣的呢？一起來(lái)看看吧。

1.為什么要進(jìn)行卵母細(xì)胞體外成熟？

 卵母細(xì)胞是雌性動(dòng)物重要的生殖細(xì)胞，成熟的卵母細(xì)胞以正確排出第一極體為特征，在排卵后會(huì)在輸卵管壺腹部等待精子的進(jìn)入，精卵結(jié)合后繼續(xù)發(fā)育成胎兒。每個(gè)寶寶的誕生都和母親健康的卵母細(xì)胞密不可分，一旦卵母細(xì)胞出了什么問(wèn)題，那將產(chǎn)生什么后果可想而知。為了研究各種因素對(duì)卵母細(xì)胞的影響以及如何提高卵母細(xì)胞質(zhì)量，于是我們就需要一個(gè)卵母細(xì)胞體外成熟模型，畢竟不方便在體內(nèi)直接進(jìn)行研究。

小鼠GV期及MII期卵母細(xì)胞

2.卵母細(xì)胞成熟階段劃分

卵母細(xì)胞起源于胚胎發(fā)育早期的胚胎干細(xì)胞（Embryonic Stem Cells, ESCs），ESCs分化成卵原細(xì)胞，卵原細(xì)胞進(jìn)入生殖腺后開始增殖，隨后，卵原細(xì)胞分化為初級(jí)卵母細(xì)胞并停滯在雙線期，又稱為GV期，這一停滯過(guò)程從未出生一直持續(xù)到青春期，到達(dá)青春期后，卵母細(xì)胞繼續(xù)往后發(fā)育，在經(jīng)過(guò)減數(shù)第一次分裂后排出第一極體，隨后又停滯在減數(shù)第二次分裂中期（MII），等待受精才會(huì)完成減數(shù)第二次分裂階段。在這個(gè)過(guò)程中，染色體有兩次機(jī)會(huì)整齊排列在赤道板上，小伙伴們想一想是哪兩次呢？不妨把你的答案留在評(píng)論區(qū)和大家一起討論吧！

3.卵母細(xì)胞體外成熟體系

卵母細(xì)胞的體外成熟（In Vitro Maturation, IVM）需要適宜的培養(yǎng)環(huán)境，如充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，適宜的CO2濃度，模擬體內(nèi)環(huán)境的溫度等。

卵母細(xì)胞的采集與培養(yǎng)：用于體外成熟的卵母細(xì)胞通常由卵巢中獲得，獲取方式有抽吸法、切割法（對(duì)于大動(dòng)物適用）、刺破卵泡法（對(duì)于小動(dòng)物適用）等，具體使用場(chǎng)景可以靈活調(diào)整。在獲取卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合物（COCs）后，挑取B類及以上的COCs放入培養(yǎng)液中，在38.5攝氏度，5%CO2濃度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合物等級(jí)劃分

卵母細(xì)胞培養(yǎng)基成分：卵母細(xì)胞的成熟培養(yǎng)需要充足的營(yíng)養(yǎng)，常用的培養(yǎng)基有TCM-199，M2等，不同的培養(yǎng)基適用的范圍并不相同，如TCM-199培養(yǎng)基含有多種氨基酸、維生素和礦物質(zhì)，而M2則含有較高的離子強(qiáng)度，對(duì)滲透壓具有更好的緩沖效果。此外，還會(huì)添加血清、激素、生長(zhǎng)因子如表皮生長(zhǎng)因子（EGF）等成分，以更好模擬體內(nèi)環(huán)境。

卵母細(xì)胞的體外成熟需要操作人員格外的小心，以免造成污染而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。