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嘉峪檢測(cè)網(wǎng) 2016-04-17 00:42
中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告
農(nóng)業(yè)部公告2386號(hào)
為統(tǒng)一規(guī)范農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)制修訂工作，我部組織制定了《農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)編制指南》，經(jīng)第一屆國(guó)家農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)審評(píng)委員會(huì)第十二次會(huì)議審議通過(guò)，現(xiàn)予以公布施行。
農(nóng)業(yè)部
2016年4月11日
農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)編制指南
一、概述
為保證農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)性、先進(jìn)性和適用性，參考GB/T 1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》、GB/T 20001.4-2001《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則 第4部分：化學(xué)分析方法》、GB/T 27404-2008《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)》、SN/T 0005-1996《出口商品中農(nóng)藥、獸藥殘留量及生物毒素生物檢驗(yàn)方法 標(biāo)準(zhǔn)編寫的基本規(guī)定》、國(guó)際食品法典委員會(huì)（CAC）的相關(guān)規(guī)定，編制《農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)編制指南》，作為農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)編制的技術(shù)依據(jù)。
二、適用范圍
本指南適用于食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)植物源性食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)的編制，其它農(nóng)產(chǎn)品、畜產(chǎn)品、水產(chǎn)品和食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)的編寫可參照本指南。
本指南中植物源性食品是指《用于農(nóng)藥最大殘留限量制定的作物分類》（農(nóng)業(yè)部公告第1490號(hào)公布）所列作物對(duì)應(yīng)的農(nóng)產(chǎn)品。
三、基本要求
1符合GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001的要求。
2文字表達(dá)結(jié)構(gòu)嚴(yán)謹(jǐn)、層次分明、用詞準(zhǔn)確、表述清楚，不致產(chǎn)生歧義。術(shù)語(yǔ)、符號(hào)統(tǒng)一，計(jì)量單位以法定計(jì)量單位表示。
3農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法技術(shù)指標(biāo)符合附錄A的要求。
四、標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)
1資料性概述要素：封面、前言、引言。
2規(guī)范性一般要素：標(biāo)準(zhǔn)名稱、警告、范圍、規(guī)范性引用文件。
3規(guī)范性技術(shù)要素：原理、試劑與材料、儀器和設(shè)備、抽樣、試樣制備、分析步驟、結(jié)果計(jì)算、精密度、圖譜、質(zhì)量保證和控制。
4資料性補(bǔ)充要素：資料性附錄。
5規(guī)范性補(bǔ)充要素：規(guī)范性附錄。
封面、前言、標(biāo)準(zhǔn)名稱、范圍、試劑與材料、儀器和設(shè)備、試樣制備、分析步驟、結(jié)果計(jì)算、精密度和圖譜為必備要素，其它為可選要素。
五、資料性概述要素
1封面要求
1.1封面標(biāo)明以下信息：標(biāo)準(zhǔn)名稱、英文譯名、標(biāo)志、編號(hào)、國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)分類號(hào)（ICS號(hào)）、中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)分類號(hào)、發(fā)布日期、實(shí)施日期、發(fā)布部門（中國(guó)人民共和國(guó)衛(wèi)生部、中國(guó)人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部）等。
1.2如果代替了某個(gè)或幾個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，封面上標(biāo)明被代替標(biāo)準(zhǔn)的編號(hào)。
1.3如果采用了國(guó)際組織標(biāo)準(zhǔn)，按照GB/T 20000.2的規(guī)定標(biāo)明一致性程度。
2前言內(nèi)容
2.1結(jié)構(gòu)說(shuō)明。
2.2代替情況說(shuō)明，標(biāo)明被代替標(biāo)準(zhǔn)或文件的編號(hào)和名稱，列出與前一版本相比主要技術(shù)變化。
2.3與國(guó)際組織或其它國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)關(guān)系說(shuō)明，與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)一致性程度按等同（IDT）、修改（MOD）和非等效（NEQ）表述；以其它國(guó)家的標(biāo)準(zhǔn)為基礎(chǔ)形成的標(biāo)準(zhǔn)，表明與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系。
2.4代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況。
六、規(guī)范性一般要素
1標(biāo)準(zhǔn)名稱
1.1標(biāo)準(zhǔn)名稱一般由引導(dǎo)要素、主體要素和補(bǔ)充要素組成。
1.1.1引導(dǎo)要素為“食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)”。
1.1.2主體要素為產(chǎn)品的名稱和檢測(cè)對(duì)象，
1.1.3補(bǔ)充要素為檢測(cè)方法，名稱統(tǒng)一為紫外/可見(jiàn)分光光度法、原子吸收分光光度法、氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法等。
示例：
—— 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 植物性食品中多菌靈殘留量的測(cè)定 液相色譜法
——英文譯名表述方式為Determination of……
2警告
2.1應(yīng)用黑體標(biāo)注對(duì)健康或環(huán)境有危險(xiǎn)或危害的分析產(chǎn)品、所用試劑或分析步驟及其注意事項(xiàng)。
2.2屬于一般性提示或來(lái)自所分析產(chǎn)品的危險(xiǎn)在范圍前標(biāo)出；來(lái)自特殊試劑或材料的危險(xiǎn)在試劑或材料名稱后標(biāo)出；屬于分析步驟固有的危險(xiǎn)在“分析步驟”一章的開(kāi)始標(biāo)出。
3范圍
3.1明確該標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)的產(chǎn)品范圍和被檢測(cè)的農(nóng)藥名稱及檢測(cè)方法。用“本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了【農(nóng)產(chǎn)品】中【農(nóng)藥名稱】殘留量【檢測(cè)方法】”表述。多殘留檢測(cè)可用附錄形式列出所有農(nóng)藥的中、英文名稱。
3.2明確檢測(cè)方法的適用界限。用“本標(biāo)準(zhǔn)適用于【農(nóng)產(chǎn)品】中【農(nóng)藥名稱】殘留的定性鑒定/定量測(cè)定”表述。
3.3標(biāo)明檢測(cè)方法的定量限，如為多殘留檢測(cè)，應(yīng)列表表示，參見(jiàn)附錄C。
4規(guī)范性引用文件
如果標(biāo)準(zhǔn)中有規(guī)范性引用文件，在該章中列出所引用文件的清單，并用下述引導(dǎo)語(yǔ)引出：
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
七 規(guī)范性技術(shù)要素
1原理
指明檢測(cè)方法的基本原理、方法特征和基本步驟。
2試劑與材料
2.1本章用下列導(dǎo)語(yǔ)開(kāi)頭：“除非另有說(shuō)明，在分析中僅使用確認(rèn)為符合殘留檢測(cè)要求等級(jí)的試劑和符合GB/T 6682一級(jí)的水”。
2.2列出檢測(cè)過(guò)程中使用的所有試劑和材料及其主要理化特性（濃度、密度等）。除了多次使用的試劑和材料，僅在制備某試劑中用到的不應(yīng)列在本章中。
2.3試劑和材料按下列順序排列：
a）以市售狀態(tài)使用的產(chǎn)品（不包括溶液），注明其形態(tài)、特性（如化學(xué)名稱、分子式、純度、CAS號(hào)），帶有結(jié)晶水的固體產(chǎn)品標(biāo)明結(jié)晶水。
b）溶液或懸浮液（不包括標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液和標(biāo)準(zhǔn)溶液），并說(shuō)明其含量；
注：如果溶液由一種特定溶液稀釋配制，按下列方法表示：
——“稀釋V1®V2”表示，將體積為V1的特定溶液稀釋為體積為V2的溶液；
——“V1+V2” 表示，將體積為V1的特定溶液加到體積為V2的溶劑中。
c）標(biāo)準(zhǔn)溶液和內(nèi)標(biāo)溶液，說(shuō)明配制方法；
注1：質(zhì)量濃度表示為g/L，或其分倍數(shù)表示，如毫克每升（mg/L）。
注2：注明有效期和貯存條件。
d）指示劑；
e）輔助材料（如干燥劑、固相萃取柱等）。
示例:
除非另有說(shuō)明，本方法所用試劑均為色譜純，水為GB/T 6682規(guī)定的實(shí)驗(yàn)室一級(jí)水。
a) 試劑
1) 氯化鈉（NaCl）；
2) 乙腈（CH3CN）；
3) 甲醇（CH3OH）。
b) 試劑配制
1) 氯化鈉溶液（20g/L）：稱取20g氯化鈉，加水溶解，用水定容至1000mL，搖勻。
2) 甲醇溶液（80+20）：量取80毫升甲醇加入20毫升水中，混勻。
c) 標(biāo)準(zhǔn)品
咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品（C8H10N4O2，CAS號(hào)：58-08-2）：純度≥99 %。
d) 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制
1) 咖啡因標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（2.0 mg/mL）：準(zhǔn)確稱取咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品20.0 mg于50mL燒杯中，用甲醇溶解，轉(zhuǎn)移到
10 mL容量瓶中，用甲醇定容。放置于4 ℃冰箱可保存半年。
2) 咖啡因標(biāo)準(zhǔn)中間液（200 μg/mL）：準(zhǔn)確吸取5.0 mL咖啡因標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液于50 mL容量瓶中，用水定容。放
置于4 ℃冰箱可保存一個(gè)月。
3儀器和設(shè)備
應(yīng)列出在分析過(guò)程中所用主要儀器和設(shè)備的名稱及其主要技術(shù)指標(biāo)。儀器設(shè)備的排列順序一般為分析儀器、常用儀器或設(shè)備。
注：編寫時(shí)不應(yīng)規(guī)定儀器或設(shè)備的廠商或商標(biāo)等內(nèi)容。
4試樣制備
應(yīng)具體寫明實(shí)驗(yàn)室樣品縮分、試樣制備過(guò)程（如取樣量、研磨、干燥、勻漿等）、試樣特性（如粒度、質(zhì)量或體積等）和試樣貯存容器材料與特性（如類型、容量、氣密性）以及貯存條件。試樣制備和貯存參見(jiàn)附錄B。
5分析步驟
不同檢測(cè)項(xiàng)目試料的處理方法不同，在編寫時(shí)應(yīng)注意寫清每一個(gè)步驟，通常使用祈使句敘述試驗(yàn)步驟，以容易閱讀的形式陳述有關(guān)試驗(yàn)。
5.1提取
應(yīng)明確以質(zhì)量或體積表示試樣的稱量。
應(yīng)寫明提取劑的名稱、用量、提取方式，以及收集容器的名稱和濃縮條件。
5.2凈化
應(yīng)寫明所用凈化材料和凈化步驟，以及收集容器的名稱、濃縮條件、定容方式和定容體積等。
5.3 衍生化
如方法需要衍生化，應(yīng)寫明衍生化步驟。
5.4儀器參考條件
應(yīng)注明檢測(cè)技術(shù)參數(shù)及操作條件。
示例1：
氣相色譜法：應(yīng)寫明色譜柱規(guī)格和型號(hào)、檢測(cè)器溫度、進(jìn)樣口溫度、色譜柱溫度、進(jìn)樣方式、進(jìn)樣體積、氣體類型和純度、流速等信息。
示例2：
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法：應(yīng)寫明色譜柱規(guī)格和型號(hào)、進(jìn)樣口溫度、檢測(cè)器溫度、色譜柱溫度、進(jìn)樣方式、進(jìn)樣體積、氣體類型和純度、流速、離子源溫度、接口溫度和質(zhì)譜檢測(cè)模式等信息。
示例3：
液相色譜法：應(yīng)寫明色譜柱規(guī)格和型號(hào)、色譜柱溫度、檢測(cè)波長(zhǎng)（紫外、熒光）、流動(dòng)相、流速、進(jìn)樣體積和梯度洗脫條件等信息。
示例4：
液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法：應(yīng)寫明色譜柱規(guī)格和型號(hào)、流動(dòng)相、流速、進(jìn)樣體積、梯度洗脫條件、離子源類型、毛細(xì)管電壓、毛細(xì)管溫度、霧化氣流量、碰撞氣類型、檢測(cè)方式等信息，多反應(yīng)監(jiān)測(cè)條件應(yīng)列表給出。
5.5標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
應(yīng)寫明標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制過(guò)程。
5.6測(cè)定
單點(diǎn)校正法應(yīng)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)溶液進(jìn)樣順序。標(biāo)準(zhǔn)工作曲線法應(yīng)規(guī)定待測(cè)組分的響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測(cè)的定量測(cè)定范圍之內(nèi)。對(duì)需要進(jìn)行平行測(cè)定的，應(yīng)予以明確規(guī)定。對(duì)于質(zhì)譜檢測(cè)，應(yīng)寫明定性和定量判定的依據(jù)。
5.7空白試驗(yàn)
不加試料或僅加空白試樣的空白試驗(yàn)應(yīng)采用與試樣測(cè)定完全相同的試劑、設(shè)備和步驟等進(jìn)行。
6 結(jié)果計(jì)算
表示測(cè)定結(jié)果時(shí)，應(yīng)注明是以何種殘留物進(jìn)行計(jì)算。農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，數(shù)值用毫克每千克（mg/kg)或毫克每升（mg/L）表示，并寫出計(jì)算公式，格式按GB/T 1.1-2009中8.8規(guī)定執(zhí)行。計(jì)算公式應(yīng)以量關(guān)系式表示，公式后要標(biāo)明編號(hào)，標(biāo)準(zhǔn)中有一個(gè)公式也要編號(hào)，編號(hào)從（1）開(kāi)始。量的符號(hào)一律用斜體，應(yīng)給出計(jì)算結(jié)果的有效數(shù)位，計(jì)算結(jié)果一般不少于兩位有效數(shù)字。
示例：
試料中被測(cè)農(nóng)藥殘留量以質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω計(jì)，數(shù)值以毫克每千克（mg/kg）表示，按公式（1）計(jì)算。
V1×Ai×V3
ω= ×r…………………………(1)
V2×Asi×m
式中：
r一標(biāo)準(zhǔn)溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L)；
Ai一樣品溶液中被測(cè)i組分的峰面積；
Asi—農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測(cè)i組分的峰面積；
V1—提取溶劑總體積，單位為毫升(mL)；
V2—吸取出用于檢測(cè)用的提取溶液的體積，單位為毫升(mL)；
V3—樣品溶液定容體積，單位為毫升(mL)；
m—試料的質(zhì)量，單位為克(g)；
計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字，當(dāng)結(jié)果大于1mg/kg時(shí)保留三位有效數(shù)字。
7精密度
7.1在重復(fù)性條件下，兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差不大于重復(fù)性限（r）, 重復(fù)性限（r）的數(shù)據(jù)見(jiàn)附錄E。
7.2在再現(xiàn)性條件下，兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差不大于再現(xiàn)性限（R）,再現(xiàn)性限（R）的數(shù)據(jù)見(jiàn)附錄F。
8圖譜
應(yīng)給出標(biāo)準(zhǔn)組份的譜圖。
注：色譜峰用阿拉伯?dāng)?shù)字順序排列，并在圖下方表明每個(gè)阿拉伯?dāng)?shù)字所代表的組份，同時(shí)應(yīng)標(biāo)出標(biāo)準(zhǔn)溶液的質(zhì)量濃度。
9其他
除以上技術(shù)內(nèi)容外，還可根據(jù)檢測(cè)方法的特點(diǎn)和需要，合理編寫其他技術(shù)內(nèi)容和關(guān)鍵技術(shù)，如對(duì)特殊情況的說(shuō)明、試驗(yàn)報(bào)告、有關(guān)圖表等。
八、資料性附錄
提供有助于標(biāo)準(zhǔn)理解或使用的附加信息，作為資料性附錄。
九、規(guī)范性附錄
當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)中的某部分應(yīng)執(zhí)行的內(nèi)容放在標(biāo)準(zhǔn)正文中影響標(biāo)準(zhǔn)結(jié)構(gòu)時(shí)，可將這部分放在正文的后面，作為規(guī)范性附錄。
附錄A
植物源性食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法編制技術(shù)要求
一、基質(zhì)材料
檢測(cè)范圍為植物源性食品的，在制定過(guò)程中基質(zhì)材料選擇應(yīng)包括：
——谷物：糙米、小麥、玉米等；
——油料：大豆或花生；
——蔬菜及制品：結(jié)球甘藍(lán)、芹菜、番茄、茄子、馬鈴薯、蘿卜、菜豆、韭菜等；
——水果及制品：蘋果或梨、桃或杏、葡萄、柑橘等；
——堅(jiān)果：杏仁或核桃；
——食用菌；
——植物油；
——茶葉；
——香辛料；
——其他。
檢測(cè)范圍為某類植物源性食品時(shí)，基質(zhì)材料選擇應(yīng)包括該類所列所有品種。
二、方法性能與質(zhì)量控制
1提取效果
方法試驗(yàn)中，應(yīng)進(jìn)行提取效果的驗(yàn)證，可用以下方法進(jìn)行試驗(yàn)：
——用陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或能力驗(yàn)證的樣品進(jìn)行試驗(yàn)；
——陽(yáng)性樣品或添加樣品用同一溶劑反復(fù)提取，觀察被分析物濃度變化；
——用不同提取技術(shù)或不同提取溶劑進(jìn)行比較。
2 方法的特異性
方法的特異性是指在確定的分析條件下，分析方法檢測(cè)和區(qū)分共存組分中目標(biāo)化合物的能力。要說(shuō)明該方法檢測(cè)信號(hào)僅與被檢組分有關(guān)，與其他化合物無(wú)關(guān)。說(shuō)明采用的分析技術(shù)需要克服任何可預(yù)見(jiàn)的干擾，特別是來(lái)自基質(zhì)組分的干擾。
確定特異性的方法：
a）一般應(yīng)對(duì)具有代表性的空白基質(zhì)和空白基質(zhì)添加被測(cè)組分的樣品，按照確定的樣品前處理方法處理后進(jìn)行分析，考察基質(zhì)中存在的物質(zhì)是否對(duì)被測(cè)組分存在干擾。
b）存在干擾峰時(shí)：
1）定量限小于或等于限量值的1/3時(shí)，干擾峰的容許范圍小于相當(dāng)于限量值濃度峰的1/10；
2）定量限大于限量值的1/3時(shí)，干擾峰的容許范圍小于相當(dāng)于定量限濃度峰的1/3。
確證方法可采用：
——不同極性或類型色譜柱確證；
——氣相色譜-質(zhì)譜法；
——液相色譜-質(zhì)譜法；
——其他。
3 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線
校準(zhǔn)曲線的工作范圍，其濃度范圍盡可能覆蓋二個(gè)數(shù)量級(jí)，至少做5個(gè)點(diǎn)（不包括空白），包括定量限、最大殘留限量或10倍定量限。對(duì)于篩選方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不低于0.98，對(duì)于確證方法，相關(guān)系數(shù)不低于0.99。測(cè)試溶液中被測(cè)組分濃度應(yīng)在校準(zhǔn)曲線的線性范圍內(nèi)。應(yīng)列出標(biāo)準(zhǔn)校準(zhǔn)曲線方程、相關(guān)系數(shù)，必要時(shí)應(yīng)給出色譜圖。
4正確度
方法的正確度是指所得結(jié)果與真值的符合程度，農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法的正確度一般用回收率進(jìn)行評(píng)價(jià)。回收率試驗(yàn)一般應(yīng)做三個(gè)水平添加，添加水平為：
——對(duì)于禁用物質(zhì)，回收率在方法定量限、兩倍方法定量限和十倍方法定量限進(jìn)行三水平試驗(yàn)；
——對(duì)于已制定MRL的，一般在1/2MRL、MRL、2倍MRL三個(gè)水平各選一個(gè)合適點(diǎn)進(jìn)行試驗(yàn)，如果MRL值是定量限，可選擇2倍MRL和10倍MRL兩個(gè)點(diǎn)進(jìn)行試驗(yàn)；
——對(duì)于未制定MRL的，回收率在方法定量限、常見(jiàn)限量指標(biāo)、選一合適點(diǎn)進(jìn)行三水平試驗(yàn)。
每個(gè)水平重復(fù)次數(shù)不少于5次，計(jì)算平均值。回收率參考范圍見(jiàn)表1。
表1 不同添加水平對(duì)回收率的要求
|
添加水平，mg/kg |
范圍，% |
相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，% |
|
£0.001 |
50~120 |
≤35 |
|
＞0.001£0.01 |
60~120 |
≤30 |
|
＞0.01£0.1 |
70~120 |
≤20 |
|
＞0.1£1 |
70~110 |
≤15 |
|
＞1 |
70~110 |
≤10 |
制作添加樣品時(shí)，使用新鮮的食品，均一化并稱量后添加農(nóng)藥。
注1：添加的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液總體積應(yīng)不大于2 mL。
注2：農(nóng)藥等添加后，充分混合，放置30 min后再進(jìn)行提取操作。
注3: 檢測(cè)時(shí)間需要數(shù)日時(shí)，將均一化的樣品冷凍保存，避免多次凍結(jié)以及融解，檢測(cè)實(shí)施日當(dāng)日制作添加樣品。
5精密度
精密度：在規(guī)定條件下，獨(dú)立測(cè)試結(jié)果間的一致程度。
注：其量值用測(cè)試結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示。
方法的精密度包括重復(fù)性和再現(xiàn)性：
a）重復(fù)性：在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一操作者使用相同設(shè)備、按相同的測(cè)試方法，并在短時(shí)間內(nèi)從同一被測(cè)對(duì)象取得相互獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的一致性程度。
每種試材都應(yīng)做重復(fù)性試驗(yàn)，重復(fù)性要做三個(gè)水平的試驗(yàn)，添加水平同回收率，每個(gè)水平重復(fù)次數(shù)不少于5次。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差符合表2的要求。
注：重復(fù)性試驗(yàn)應(yīng)按照樣品處理方法獲得添加均勻的試樣，再對(duì)試樣進(jìn)行獨(dú)立5次以上分析。
表2 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差
|
被測(cè)組分含量，mg/kg |
相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，% |
|
£0.001 |
≤36 |
|
＞0.001£0.01 |
≤32 |
|
＞0.01£0.1 |
≤22 |
|
＞0.1£1 |
≤18 |
|
＞1 |
≤14 |
b）再現(xiàn)性：在不同實(shí)驗(yàn)室，由不同操作者按相同的測(cè)試方法，從同一被測(cè)對(duì)象取得相互獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的一致性程度。
試驗(yàn)應(yīng)在不同實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)室個(gè)數(shù)不少于3個(gè)（不包括標(biāo)準(zhǔn)起草單位）。再現(xiàn)性做三個(gè)添加水平試驗(yàn)，其中一個(gè)添加水平必須是定量限，添加水平同重復(fù)性，每個(gè)水平重復(fù)次數(shù)不少于5次。實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)符合表3的要求。
表3 實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差
|
被測(cè)組分含量，mg/kg |
相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，% |
|
£0.001 |
≤54 |
|
＞0.001£0.01 |
≤46 |
|
＞0.01£0.1 |
≤34 |
|
＞0.1£1 |
≤25 |
|
＞1 |
≤19 |
6 定量限
定量限是指可以進(jìn)行準(zhǔn)確定性和定量測(cè)定的最低水平，在該水平下得到的回收率和精密度應(yīng)滿足表1和表2的要求。
注：添加標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度得到的信噪比一般為10。
7驗(yàn)證試驗(yàn)
驗(yàn)證項(xiàng)目包括方法使用的所有基質(zhì)材料的回收率、精密度和定量限。
附錄B
樣品制備
一、樣品預(yù)處理
根據(jù)農(nóng)藥最大殘留限量定義的作物部位，可按以下方法處理樣品：
——對(duì)于個(gè)體較小的樣品，去掉核、殼等，取出可食部分；
——對(duì)于個(gè)體較大的基本均勻樣品，可沿對(duì)稱軸或?qū)ΨQ面上分割或切成小塊；
——對(duì)于細(xì)長(zhǎng)、扁平或組分含量在各部分有差異的樣品，可在不同部位切取小片或截成小段；
——對(duì)于果皮可食的樣品，取全果，對(duì)于果皮不可食的樣品，取果肉；
——對(duì)于谷類和豆類等粒狀、粉狀或類似的樣品，應(yīng)堆成圓錐體—壓成扁平形—劃兩條交叉直線分成四等分—取對(duì)角部分進(jìn)行縮分，或用分樣器等其他方法進(jìn)行縮分。
經(jīng)上述處理后的樣品采取適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行混合。
注1：上述樣品預(yù)處理方法如果與GB2763《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量》附錄A中相關(guān)的內(nèi)容有沖突，應(yīng)按照附錄A中規(guī)定的方法處理。
注2：樣品預(yù)處理的量，應(yīng)根據(jù)相應(yīng)產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定執(zhí)行。
二、試樣制備
不同試樣可按以下方法制備：
—— 谷類、油料：將樣品粉碎混勻，使其全部可以通過(guò)425μm的標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)篩；
—— 蔬菜、水果：切碎混勻后均一化制成勻漿；
—— 食用菌：新鮮的食用菌按蔬菜、水果處理；干制品按谷類處理；
—— 茶葉、脫水制品：將樣品粉碎混勻，使其全部可以通過(guò)425μm的標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)篩；
—— 香辛料：根據(jù)形態(tài)，按照谷類或水果進(jìn)行處理；
—— 冷凍制品：解凍后（冷凍樣品中的冰晶和水不得丟棄），立即均一化制成勻漿；
—— 醬、油和汁：攪拌均勻。
——對(duì)于粉碎后粘性高無(wú)法過(guò)篩的樣品，應(yīng)保證樣品粉碎均勻且滿足提取要求。
三、試樣貯存
試樣應(yīng)放在清潔、結(jié)實(shí)的容器或包裝袋內(nèi)。對(duì)蔬菜水果等含水量高的樣品，可選用聚乙烯瓶，對(duì)于谷物等干樣，可選用聚乙烯塑料袋，但對(duì)于那些要進(jìn)行薰蒸劑殘留分析的樣品，應(yīng)采用低滲透性的包裝袋（如尼龍薄膜袋）等。試樣應(yīng)在規(guī)定的保質(zhì)期內(nèi)進(jìn)行分析，必要時(shí)采用冰凍儲(chǔ)存。試樣應(yīng)有清晰牢固的識(shí)別標(biāo)記，防止造成標(biāo)記的遺失和混亂。裝有供薰蒸劑殘留分析的試樣的包裝袋上不應(yīng)該用含有有機(jī)溶劑的記號(hào)筆做標(biāo)記。
附錄C
農(nóng)藥名稱及參考數(shù)據(jù)
表C 農(nóng)藥名稱及主要參考數(shù)據(jù)
|
序號(hào) |
中文名稱 |
英文名稱 |
保留時(shí)間 min |
定量限 mg/kg |
質(zhì)量濃度 mg/L |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
附錄D
精密度的計(jì)算
精密度的表示和計(jì)算
1 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)整理格式
表D.1驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)整理格式（水平X）
|
重復(fù)n |
實(shí)驗(yàn)室1 |
實(shí)驗(yàn)室2 |
實(shí)驗(yàn)室3 |
實(shí)驗(yàn)室4 |
|
1 |
|
|
|
|
|
2 |
|
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
|
4 |
|
|
|
|
|
5 |
|
|
|
|
2各實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的數(shù)據(jù)平均值、方差的計(jì)算
表D.2 單元平均值及方差的整理格式（水平X）
|
|
實(shí)驗(yàn)室1 |
實(shí)驗(yàn)室2 |
實(shí)驗(yàn)室3 |
實(shí)驗(yàn)室4 |
|
平均值 |
|
|
|
|
|
方差 |
|
|
|
|
表D.2按下式計(jì)算平均值及方差：
=
=
式中：
i—第i個(gè)實(shí)驗(yàn)室;
—第i個(gè)實(shí)驗(yàn)室的第j個(gè)數(shù)據(jù);
n—每個(gè)實(shí)驗(yàn)室重復(fù)測(cè)量次數(shù)。
3 用科克倫(Cochran)檢驗(yàn)法檢驗(yàn)方差齊性
按下式計(jì)算科克倫計(jì)算量：
=
式中：
s2max—各實(shí)驗(yàn)室
中的最大值;
p—實(shí)驗(yàn)室的數(shù)量。
注1：若科克倫檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量C的數(shù)值小于或等于0.05臨界值(即統(tǒng)計(jì)量C的95%的分位數(shù))，則認(rèn)為各實(shí)驗(yàn)室的方差齊性。
注2：若科克倫檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量C的數(shù)值大于0.05臨界值(即統(tǒng)計(jì)量C的95%的分位數(shù))，但小于或等于0.01臨界值(即統(tǒng)計(jì)量C的99%的分位數(shù))，則s2max為歧離值，相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室用單星號(hào)（*）標(biāo)出，需經(jīng)領(lǐng)導(dǎo)小組研究、決定取舍。
注3：若科克倫檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量C的數(shù)值大于0.01臨界值（即統(tǒng)計(jì)量C的99%的分位數(shù)），則s2max為統(tǒng)計(jì)離群值，相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室用雙星號(hào)（**）標(biāo)出，其數(shù)據(jù)全部剔除。剔除s2max以后，繼續(xù)對(duì)其余p-1個(gè)方差中的最大方差進(jìn)行檢驗(yàn)，直到滿足方差齊性要求為止。
注4：科克倫檢驗(yàn)的臨界值表參見(jiàn)GB/T 10092-2009。
4格拉布斯(Grubbs)檢驗(yàn)
4.1計(jì)算格拉布斯統(tǒng)計(jì)量
4.1.1將同一水平下的測(cè)量數(shù)據(jù)按從小到大的順序排列。
4.1.2計(jì)算平均值
和標(biāo)準(zhǔn)差s。
4.1.3計(jì)算偏離值：即平均值與最小值之差
-xmin和最大值與平均值之差xmax-。
4.1.4確定一個(gè)可疑值：比較最大值與平均值之差和平均值與最小值之差，將差值較大者認(rèn)定為可疑值。
4.1.5計(jì)算Gi值：Gi＝(xi-)/s；其中i是可疑值的排列序號(hào)。
4.2進(jìn)行格拉布斯檢驗(yàn)
4.2.1若檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量G的數(shù)值小于或等于0.05臨界值（即統(tǒng)計(jì)量G的95%的分位數(shù)），則認(rèn)為各實(shí)驗(yàn)室無(wú)異常數(shù)據(jù)。
4.2.2若檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量G的數(shù)值大于0.05臨界值（即統(tǒng)計(jì)量G的95%的分位數(shù)），但小于或等于0.01臨界值（即統(tǒng)計(jì)量G的99%的分位數(shù)），則可疑值為岐離值，且用單星號(hào)（*）標(biāo)出，經(jīng)分析研究后，做出是否剔除的決定。
4.2.3如果檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量G的數(shù)值大于0.01臨界值（即統(tǒng)計(jì)量G的99%的分位數(shù)），則可疑值稱為統(tǒng)計(jì)離群值，且用雙星號(hào)（**）標(biāo)出，其數(shù)據(jù)剔除。剔除統(tǒng)計(jì)離群值后，繼續(xù)對(duì)其余的測(cè)量數(shù)據(jù)進(jìn)行檢驗(yàn)至滿足4.2.1為止。
4.3格拉布斯檢驗(yàn)的臨界值表參見(jiàn)GB/T 4883-2008。
5重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差sr和再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差sR
5.1每個(gè)水平需要計(jì)算3個(gè)方差：重復(fù)性方差
、實(shí)驗(yàn)室間方差
、再現(xiàn)性方差
。
先計(jì)算以下數(shù)值：
T1=Σnii
T2=Σnii2
T3=Σni
T4=Σ（ni）2
T5=Σ（ni-1）Si2
Sr2=T5/( T3-p)
=+
式中：
第i個(gè)實(shí)驗(yàn)室的平均數(shù)；
ni—第i個(gè)實(shí)驗(yàn)室的重復(fù)測(cè)量次數(shù)；
—第i個(gè)實(shí)驗(yàn)室的方差；
p—實(shí)驗(yàn)室數(shù)量；
6精密度評(píng)價(jià)
6.1重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差的符合性
×100%如小于 表2 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差中對(duì)應(yīng)組分含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，則認(rèn)為重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差具有符合性。
注：每個(gè)組分的不同含量水平均需將計(jì)算結(jié)果進(jìn)行符合性檢查，且均需小于對(duì)應(yīng)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。
6.2再現(xiàn)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差的符合性
×100% 如小于 表3實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差中對(duì)應(yīng)組分含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，則認(rèn)為再現(xiàn)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差具有符合性。
注：每個(gè)組分的不同含量水平均需將計(jì)算結(jié)果進(jìn)行符合性檢查，且均需小于對(duì)應(yīng)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。
6.3 結(jié)論
在6.1和6.2都具有符合性的基礎(chǔ)上,則方法精密度通過(guò)評(píng)價(jià)要求.
示例：
a) 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)整理格式
假設(shè)檢測(cè)組分為X。X的三個(gè)水平分別為1 mg/kg、2 mg/kg和10 mg/kg，4個(gè)單位參與了方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。
其中水平1mg/kg的驗(yàn)證數(shù)據(jù)見(jiàn)下表：
表A 1mg/kg水平驗(yàn)證數(shù)據(jù)
|
重復(fù)n |
實(shí)驗(yàn)室1 |
實(shí)驗(yàn)室2 |
實(shí)驗(yàn)室3 |
實(shí)驗(yàn)室4 |
|
1 |
1.12 |
1.23 |
1.22 |
1.01 |
|
2 |
1.3 |
1.1 |
0.97 |
1.07 |
|
3 |
1.2 |
1.09 |
1.13 |
1.02 |
|
4 |
1.09 |
1.17 |
1.05 |
1.03 |
|
5 |
1.2 |
1.16 |
1.9 |
1.05 |
b) 各實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的數(shù)據(jù)平均值、方差的計(jì)算
公式：
=
=
計(jì)算結(jié)果見(jiàn)下表：
表B 1mg/kg水平驗(yàn)證數(shù)據(jù)平均值和方差計(jì)算結(jié)果
|
重復(fù) |
實(shí)驗(yàn)室1 |
實(shí)驗(yàn)室2 |
實(shí)驗(yàn)室3 |
實(shí)驗(yàn)室4 |
|
平均值 |
1.182 |
1.15 |
1.254 |
1.036 |
|
方差 |
0.00672 |
0.00325 |
0.13903 |
0.00058 |
c) 用科克倫(Cochran)檢驗(yàn)法檢驗(yàn)方差齊性
本示例中
C=
=0.92947
查表得：
C（0.05，4，5）=0.6287
C（0.01，4，5）=0.7212
因?yàn)镃＞C（0.05，4，5）且C＞C（0.01，4，5），因此需要剔除實(shí)驗(yàn)室3的數(shù)據(jù)。重新計(jì)算科克倫檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量。
表C 1mg/kg水平驗(yàn)證數(shù)據(jù)平均值和方差計(jì)算結(jié)果
|
示—重復(fù) |
實(shí)驗(yàn)室1 |
實(shí)驗(yàn)室2 |
實(shí)驗(yàn)室4 |
|
平均值 |
1.182 |
1.15 |
1.036 |
|
方差 |
0.00672 |
0.00325 |
0.00058 |
C==0.637
C（0.05，3，5）=0.7457
C（0.01，3，5）=0.8335
因?yàn)镃＜C（0.05，3，5），因此不需要再繼續(xù)剔除數(shù)據(jù)。
d）格拉布斯(Grubbs)檢驗(yàn)
1) 將上述測(cè)量數(shù)據(jù)按從小到大的順序排列，得到1.01、1.02、1.03、1.05、1.07、1.09、1.09、1.1、1.12、1.16、1.17、1.2、1.2、1.23、1.3。可以肯定可疑值不是最小值就是最大值。
2) 計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差s。計(jì)算得：=1.123；標(biāo)準(zhǔn)差s=0.0850（計(jì)算時(shí)，應(yīng)將所有15個(gè)數(shù)據(jù)全部包含在內(nèi)）。
3) 計(jì)算偏離值：平均值與最小值之差為1.123-1.01=0.113；最大值與平均值之差為1.3-1.123=0.177。
4) 確定一個(gè)可疑值：比較起來(lái)，最大值與平均值之差0.177大于平均值與最小值之差0.113，因此認(rèn)為最大值1.3是可疑值。
5) 計(jì)算Gi值：Gi＝(xi-)/s；其中i是可疑值的排列序號(hào)15；因此G15=( x15-)/s=(1.3-1.123)/ 0.0850=2.08。
6) 查格拉布斯表獲得臨界值：ni=15,檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量G的0.05臨界值（即統(tǒng)計(jì)量G的95%的分位數(shù)）為2.409，即G15<G，表明實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)無(wú)異常。
e) 重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差sr和再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差sR
每個(gè)水平需要計(jì)算3個(gè)方差。
重復(fù)性方差
、實(shí)驗(yàn)室間方差
、再現(xiàn)性方差
。
本例中：
ni=5，p=3，根據(jù)表C的結(jié)果：
T1=（1.182×5）+（1.15×5）+（1.036×5）=16.84
T2=(1.1822×5)+(1.152×5)+(1.0362×5)=18.964
T3=15
T4=75
T5=（0.00672×4）+（0.00325×4）+（0.00058×4）=0.0422
Sr2=0.0422/（15-3）=0.00352
SL2=[（18.9646×15-16.84×16.84）/（15×2）-0.00352][15×2/（225-75）]=〔（284.469-283.5856）/30-0.00352〕×0.2＝0.005185
SR2＝0.00352+0.005185=0.008705
Sr=0.0593
SR=0.0937
f）精密度評(píng)價(jià)
1) 重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差的符合性
×100%=
=5.25%
表2 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差
|
被測(cè)組分含量，mg/kg |
相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，% |
|
£0.001 |
≤36 |
|
＞0.001£0.01 |
≤32 |
|
＞0.01£0.1 |
≤22 |
|
＞0.1£1 |
≤18 |
|
＞1 |
≤14 |
重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差5.25%小于18%(對(duì)應(yīng)被測(cè)組分含量為>0.1≤1, mg/kg),具有符合性。
2) 再現(xiàn)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差的符合性
×100%=
=8.34%
表3 實(shí)驗(yàn)室間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差
|
被測(cè)組分含量，mg/kg |
相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，% |
|
£0.001 |
≤54 |
|
＞0.001£0.01 |
≤46 |
|
＞0.01£0.1 |
≤34 |
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＞0.1£1 |
≤25 |
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＞1 |
≤19 |
再現(xiàn)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差8.34%小于25%(對(duì)應(yīng)被測(cè)組分含量為>0.1≤1, mg/kg),具有符合性。
(其它含量水平的驗(yàn)證方法同上)。
3) 結(jié)論
被測(cè)組分含量為1mg/kg、2mg/kg和10mg/kg三個(gè)水平的重復(fù)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差和再現(xiàn)性相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差均具有符合性,該方法精密度通過(guò)評(píng)價(jià)要求。
附錄E
重復(fù)性限的計(jì)算
1. 重復(fù)性限: 一個(gè)數(shù)值，在重復(fù)性條件下，兩次測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差小于或等于此數(shù)的概率為95%。
2. 重復(fù)性限用r來(lái)表示。
3. 重復(fù)性限的計(jì)算：r=2.8Sr 其中Sr為重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)差。
4. 重復(fù)性限的表示方法：
表E 重復(fù)性限r(nóng)
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序號(hào) |
農(nóng)藥名稱 |
含量 mg/kg |
重復(fù)性限 r |
含量 mg/kg |
重復(fù)性限 r |
含量 mg/kg |
重復(fù)性限 r |
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附錄F
再現(xiàn)性限的計(jì)算
1. 再現(xiàn)性限: 一個(gè)數(shù)值，在再現(xiàn)性條件下，兩次測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差小于或等于此數(shù)的概率為95%。
2. 再現(xiàn)性限用R來(lái)表示。
3. 再現(xiàn)性限的計(jì)算：R=2.8SR 其中SR為再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)差。
4. 再現(xiàn)性限的表示方法：
表F 再現(xiàn)性限R
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序號(hào) |
農(nóng)藥名稱 |
含量 mg/kg |
再現(xiàn)性限 R |
含量 mg/kg |
再現(xiàn)性限 R |
含量 mg/kg |
再現(xiàn)性限 R |
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來(lái)源：農(nóng)業(yè)部
