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氨基柱如何再生?

嘉峪檢測網(wǎng)        2024-11-26 08:29

色譜新手:我們在用的氨基柱時,有時候峰型突然變寬,有拖尾,用一段時間就又好了,不明白是什么原因造成的,如果要再生氨基柱的時候應(yīng)該怎么做呢?是像您先前回答的問題中提到的,用一定比例的氨水沖洗嗎?氨基柱可以直接用純水沖洗嗎?記得當(dāng)時買的氨基柱那個使用說明書上說不能用純水沖?是這樣的嗎?如果可以沖的話,一般沖多久?

 

老手解答:氨基柱的硅膠孔內(nèi)的氨基濃度非常高(大約有1mol/L),在有水存在的時候,在孔內(nèi)形成一個pH10左右甚至超過10的很強(qiáng)的堿性小環(huán)境,并會導(dǎo)致硅膠基體慢慢溶解。不過硅膠基體的溶解會生成酸性的硅醇基,又會降低孔內(nèi)的pH值,延緩硅膠基體的溶解進(jìn)程。一段時間后,兩個相反的過程會達(dá)成一個動態(tài)平衡,從而穩(wěn)定下來。對你問題提到的這個現(xiàn)象,我想到的是這個原因。氨基柱,要看氨基柱的應(yīng)用模式,是正相還是HILIC?這兩種模式的情況是大不相同的。正相使用,一般很怕有水。但HILIC模式應(yīng)用,一般流動相是乙腈/水,是不怕水的。不過鍵合氨丙基基團(tuán)非常容易水解,所以一般氨基柱不適宜保存有水的溶劑中。作為正相應(yīng)用時,流動相中要求一點都不能含水,但清洗柱子上的污染物質(zhì),是可以含水的,因為水有強(qiáng)極性,在正相色譜上洗脫能力極強(qiáng),當(dāng)然不必用100%純水。氨基柱具體沖洗方法,正相條件按照正相硅膠柱的清洗方法,HILIC模式按C18柱的清洗方法。

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