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嘉峪檢測網 2025-03-13 08:44
從臨床前研發到商業化生產及上市，整個藥物研發過程中會產生大量化學、生產和控制（CMC）數據，這些數據用于支持產品質量對比、闡明產品/雜質結構、評估關鍵質量屬性、開發藥物遞送方式以及開發長期穩定的藥品制劑。即使藥物獲批后，藥品的CMC工作依然在繼續，以支持產品的持續改進和市場策略。所以，產品生命周期管理跨越的時間段很長，覆蓋的研發活動也很廣。
這其中，許多支持性數據可能是在非cGMP的R&D實驗室中生成的。尤其對于生物類似藥，與參照藥物進行藥學對比研究幾乎完全依賴于R&D中非cGMP方法生成的分析數據。然而，雖然針對不同階段cGMP活動的監管指南比較成熟，但目前尚無針對非cGMP研究的CMC實驗室的質量實踐指南。當R&D實驗室開展支持生物制品開發和生命周期管理的CMC研究時，也是希望產生的數據準確，且可以重復。這一原則幾乎被所有R&D實驗室所遵循。然而，R&D數據的可靠性可能受到多種因素的影響，包括未進行檢測的不穩定的試劑或材料、未校準或超出誤差范圍的儀器（包括移液器）、設備故障（如冰箱、培養箱）、檢測程序錯誤、文件記錄缺失或不全、原始數據文件不完整、未記錄的分析員錯誤等。R&D階段質量差異可能會影響產品知識產權（IP）申請，影響合作伙伴的盡職調查審計，誤導戰略決策，影響投融資，并削弱公司的聲譽等。此外，R&D階段數據也可能會受到來自藥品監管機構的審查。因此，確保R&D階段數據的可靠性和可追溯性至關重要。
由于缺乏監管機構針對R&D階段質量的指導文件，行業從業人員可能會錯誤地實施cGMP或GLP，亦或者可能什么也不做，做成啥樣是啥樣。當然，過度套用cGMP或GLP的要求，可能會創建一個過于受限的研發環境，抑制創新，延長研發周期，并增加藥品開發成本。所以，既不能放任不管，也不能過度要求。眾所周知，CMC研究框架中有既定條件（Established Conditions, ECs）和支持性信息（Supportive Information）是兩個重要概念，前者指按照現行cGMP的法規要求進行的生產和檢測活動，后者指在藥品開發過程中生成的、用于支持向監管機構提交的數據和信息，但這些信息本身不受cGMP的直接約束。舉個例子，根據ICH Q7，對于重組生物藥物的生產過程，建立主細胞庫（MCB）和工作細胞庫（WCB）的活動不需要完全符合cGMP。雖然不受cGMP約束，但建立MCB/WCB的R&D活動需要有完整的記錄，細胞庫的表征和穩定性數據需要可靠且準確。監管指南將這些非cGMP的R&D研究定義為“支持性信息”。cGMP從用于上游生產的WCB的維護開始適用，則屬于“既定條件”的范圍。
很明顯，R&D階段的質量相關體系更多與“支持性信息”有關，這也是本文擬討論的重點。
可能的監管風險
在IND和BLA申請中，“支持性信息”在Module 3模塊呈現。監管機構要求支持性CMC數據必須準確且可靠，無論這些數據是來自藥企自己的研發實驗室，還是由CDMOs的研發實驗室產生，這一點都是適用的。FDA在新藥批準前檢查（Pre-Approval Inspections, PAI）中，驗證模塊3中提交的支持性CMC數據的真實性與完整性是其明確目標之一。盡管FDA PAI的第一個目標是確認商業化生產和檢測的cGMP合規性，但其他三個PAI目標均與質量風險管理與數據完整性相關，如下所示：
目標2：與申請的一致性
檢查內容應包括實驗室方法的檢查，包括審計R&D 記錄本等。確保申請文件中描述的生產工藝和質量控制方法與實際操作一致。
目標3：數據完整性審計
審計產品數據的準確性和完整性。并非每個CMC數據匯總都需要審計。檢查策略可能會選擇開發過程中的關鍵數據集，將原始數據（紙質或電子版）——如色譜圖、光譜圖、實驗室分析員筆記本以及實驗室的其他信息——與CMC部分提交的匯總數據進行比對。檢查申請文件中提交的數據是否完整且準確，確保所有相關數據均已提交。
目標4：對藥物開發質量的承諾
目標4旨在評估企業的藥品開發計劃，包括其支持、定義、管理和持續評估其有效性的情況，以及其在支持藥品質量體系持續改進中的作用。評估企業是否制定了全面的藥品開發計劃，以確保產品質量和工藝設計的科學性。檢查管理層是否在藥品開發過程中展現出對質量的明確承諾。評估企業是否建立跨學科的研發團隊，以支持藥品開發的各個環節。檢查企業是否在藥品開發過程中應用了質量風險管理原則，以識別和控制潛在風險。
在監管機構的現場檢查中發現cGMP設施普遍存在數據完整性問題后，數據完整性體系的監管審查的形勢就變得緊迫起來。因此，多個監管機構發布了指導文件，加強了對數據完整性及其質量體系建立的期望。FDA關于數據完整性的指導文件中指出，支持數據完整性的體系應能夠在數據生命周期內輕松檢測到錯誤、遺漏和異常結果。
由于支持性CMC研究不受嚴格的cGMP或GLP合規性約束（包括計算機化系統和電子數據的Part 11驗證和控制要素），因此申辦方有責任為其研發CMC活動創建適當的質量體系。
CMC R&D實驗室基于風險的質量實踐
下表是一個分級的研發質量風險管理框架示例表，主要基于數據在監管申報中的使用時間和方式劃分的。其中，Tier 0和cGMP data不在本文討論之列。Tier0僅用于內部支持初步CMC決策的研發活動，每家公司可自行評估風險，并實施最能平衡風險與時間和成本的質量實踐。cGMP數據國內外已經有很成熟的監管指南。
R&D實驗室質量體系框架
從廣義上講，藥物開發數據在整個臨床前、臨床和商業化開發生命周期中的完整性，最終會影響制造藥品的質量。Tier 0代表研發過程中的篩選/探索性研究，這些研究通常納入申報資料，需要質量體系控制要求最低。cGMP數據與每個生產批次的質量緊密相關，如果不嚴格遵循cGMP要求，則產品出現質量問題的風險較高。
Tier 1和Tier 2是為非cGMP CMC研發研究設計的，用于收集支持性信息。Tier 1和Tier 2的研發數據可能會提交給監管機構，不過是在開發的不同階段、出于不同目的或用于支持特定變更請求時提交。許多在早期開發中用于支持臨床試驗的CMC研究會在后期開發中更新和確認，例如用于工藝性能確認（PPQ）研究。在獲得商業化批準（BLA/MAA）后，可能會進行額外的R&D實驗室工作，以初步評估可能的上市后變更（PAC）。
Tier 1和Tier 2研發質量風險管理計劃的框架內容舉例如下：1）R&D研究中使用的原材料/試劑的控制；2）R&D樣品保管鏈程序；3）設備管理（比如溫度管控）；4）使用時儀器的性能是否符合要求；5）基于ALCOA+原則的文件記錄/數據完整性，包括可追溯性、清晰可讀、當時記錄、原始記錄、記錄的準確性，而且記錄應完整、一致、持久和可獲取。以下會逐一介紹。
原材料和試劑的控制
Tier 1和Tier 2：原材料（如試劑、色譜樹脂、參照品等）的質量必須是可接受的（通常是藥典級或更高級別）。俗話說：“garbage in, garbage out！”。在早期開發中使用藥典級材料有助于減少后續開發過程中出現的質量問題。
應建立基于風險的系統以確保原材料和試劑的質量，如依賴供應商的分析證書（CoA）、到貨時的檢測和/或穩定性測試。
所有實驗室應在原材料/試劑上標注有效期（如果制造商未提供）。如果原材料已過期或不再適合其預期用途，則應丟棄。如果制造商未提供有效期，或者對于實驗室自制試劑和關鍵試劑，可以通過科學推理（即根據準備材料的科學家的最佳判斷）或通過實測研究來推導或延長材料的有效期。
除了未開封試劑容器上的有效期外，試劑還應標注開封日期。這對于不穩定的試劑（例如聚山梨酯）尤為重要。操作人員應在實驗記錄本中記錄所有擬使用的原材料的批號和有效期，以及關鍵耗材（如色譜樹脂、色譜柱等）的批號。如果在關鍵R&D研究中使用了過期的試劑或材料，則應記錄其理由和對應開展的支持性研究。
樣品的保管鏈程序
保管鏈程序是指從樣品或證據的采集、收集、運輸、存儲到最終使用的整個過程中，對樣品或證據的流轉、管理和記錄的系統性程序。其目的是確保樣品或證據在整個過程中的真實性、完整性和可追溯性。Tier 1和Tier 2樣品應具有唯一性或可區分的名稱，接收實驗室應記錄維持保管鏈所需的信息（例如，接收日期以及樣品的狀態和身份）以及樣品的存儲位置。
受控溫度單元
Tier 1：用于儲存測試樣品、參照標準品、檢測對照品以及關鍵試劑或材料的受控溫度單元（CTUs）應進行監控，以確保其維持正確的溫度。每周至少進行一次確認性溫度檢查，并將結果記錄在日志中。為了捕捉兩次檢查之間可能出現的溫度波動，建議在每個CTU中放置一個數字式最小/最大溫度計。每次溫度檢查時，記錄監控期間的溫度范圍，并為下一個周期重置溫度計。對于特定應用（例如樣品孵育步驟、強制降解研究）的CTUs，在研究執行期間也應進行監控（例如使用最小/最大溫度計），以確認實際溫度是否符合預期。需要注意的是，最小/最大溫度計僅提供溫度范圍，無法捕捉溫度波動的頻率或持續時間。如果儲存或研究條件下的溫度超出預期范圍，其潛在影響應在Tier 1研發數據集中進行描述和說明。
Tier 2：用于儲存和處理測試樣品、參照標準品、檢測對照品以及關鍵試劑或材料的CTUs也應進行監控，以確保其持續維持正確的溫度條件，包括用于生物類似藥比對分析（CAA）研究的參比制劑的儲存和處理。然而，Tier 2的CTUs監控系統應能夠捕捉溫度波動的范圍、頻率和持續時間，而不僅僅是總體的最小/最大值。在科學合理的情況下，一些Tier 2的溫控試劑和材料可以儲存在Tier 1級別的CTUs中。此外，對于Tier 2研究中運輸的高度關鍵材料和樣品（例如生物類似藥比對分析研究中的原研參比制劑），每次運輸應包含溫度監控設備。溫度波動的潛在影響（包括范圍、頻率和持續時間）應在相關的Tier 2研發數據集中進行描述和說明。
R&D操作人員/分析人員培訓
Tier 1：鑒于Tier 1工作處于開發的早期階段且具有研發性質，實驗室管理人員可以自行判斷操作人員是否接受過充分的培訓，無需培訓記錄文件。對于某些步驟，可以通過確認檢測方法的正確執行來作為操作人員接受適當培訓的證據。
Tier 2：Tier 2相關步驟的操作人員培訓可以通過正式的培訓記錄進行留存，也可以基于書面經歷（例如個人簡歷）來證明其具備該操作的技術資質。主管人員應通過操作人員對研究方案的執行和文件記錄等相關實踐的滿意度，評估其對研發質量體系的理解。是否重新評估個人的培訓資格由實驗室管理人員自行決定。
儀器設備的認證/維護
Tier 1和Tier 2：分析儀器的安裝應遵循制造商的建議，并可使用適當的對照樣品進行測試，以確保儀器安裝正確且按預期運行。可以進行研發儀器的正式安裝和運行確認（I/OQ），但并非必須，尤其是在常規分析中進行了適當的系統適用性檢查的情況下。
應使用系統適用性對照（適當的陽性和陰性對照樣品），并記錄相應的系統適用性結果，以證明儀器在使用時運行正常。例如，建議采用基于工作流程的性能指標，并使用已知的參考材料和空白緩沖液來證明色譜或電泳分離方法的適用性。
性能確認（PQ）可以通過使用針對每種儀器和工作流程建立的適當靈敏和特異的系統適用性指標來證明。應根據需要進行預防性維護（PM），以防止或糾正系統性能問題。
應使用適當的對照進行定期校準檢查，以確保結果準確，并記錄其校準狀態（例如，是否在公差范圍內）。例如，pH計應在使用當天進行三點pH校準。重量分析系統應在使用時或根據適當頻率，使用經過NIST認證的砝碼進行校準。體積系統應根據預期用途建立校準或驗證計劃。用于體積轉移的移液管可能比用于含量/活性定量分析的移液管有較寬松的校準要求。分析人員應接受關于可能影響移液管適用性的因素（例如，掉落）的培訓。
Tier 2：有效避免測量不準確的關鍵在于認識到在關鍵R&D研究中使用性能不佳或超出公差范圍的儀器可能導致的潛在影響，并采取實際措施幫助實驗室最大限度地減少生成錯誤數據的風險，這些數據可能會影響關鍵的CMC決策。然而，在Tier 2研究中（例如生物類似藥的比對分析研究），通常對儀器性能和測量準確性的要求更高。對于高風險研究，用于確認研發儀器運行狀態的嚴格程度應通過分析目的（例如，產品屬性類型）、測試設計（例如，獨立樣本與并列樣本）和測量性質（例如，定性、相對定量）的風險評估來證明。
數據的可追溯性、清晰性、及時性、原始性或真實性
Tier 1：無論什么分級，存儲原始數據時都應遵循ALCOA+原則（國際上廣泛認可的數據完整性標準）。數據應可追溯到具體用戶，使用實驗記錄本（紙質或電子）或其他類似的記錄系統來標識執行工作的分析人員、樣品的唯一標識、用于收集數據的設備的唯一標識，以及數據收集和分析軟件的名稱和版本。
手寫筆記和草圖必須清晰可讀，并盡可能在實驗執行時及時記錄在實驗記錄本中。實驗室應考慮使用電子實驗記錄系統，該系統要求每個用戶使用個性化且唯一的登錄憑證，并且最好符合21 CFR Part 11的要求，這類實驗記錄系統現已廣泛可用且相對經濟實惠。尤其適用于生物類似藥開發，因為其高度依賴于CMC開發實驗室產生的分析相似性數據。使用紙質實驗記錄本的實驗室應考慮紙質記錄可能被視為“原始數據”，需采用額外的控制措施，例如witness簽名，以確保數據完整性。
Tier 2：包括Tier 1的所有內容。此外，對于數據、元數據和補充電子文件，還應實施電子或紙質審計追蹤，以便能夠從結果追溯到原始數據、設備操作員以及使用日期和時間。
數據和文件的準確性
Tier 1和Tier 2：數據完整性實踐還應確保數據的完整性、一致性、持久性和可獲取性。由數據收集和分析軟件生成的數據和元數據應以結果能夠重現的方式存儲。實驗記錄本應經過審核，以確保實驗設計合理，并且記錄的數據能夠支持該設計。即使在Tier 1活動中，數據準確性不佳也會給公司知識產權保護帶來顯著風險。在Tier 2中，數據準確性不佳可能比Tier 1更嚴重地影響產品質量和/或潛在的產品的監管批準。
盡管CMC開發的實驗室研究內容通常不受正式質量保證（QA）監督，但數據準確性的最終確認可以通過數據驗證（DV）來實現，由獨立于實驗活動的個人進行。
需要注意的是，即使在Tier 1和Tier 2研究中已經進行了實驗室級別的數據驗證，這些研究可能在數月甚至數年后才會正式在監管申報中報告。為了增強信心，尤其是Tier 2數據的信心，一些公司可能會選擇在提交文件時重新審查和確認數據驗證活動。在提交關鍵研發數據之前進行這種回顧性驗證可能特別重要，尤其是在歷史數據由多個實驗室生成且研發質量實踐不一致，或者在某個實驗室尚未實施這些實踐的情況下。
Tier 1數據驗證：由第二位科學家對科學方法進行審核。第二位科學家簽署所有實驗記錄本，表明實驗已被“閱讀并理解”。報告通過抽查的方式與實驗記錄本記錄進行核對，但不要求進行全部的數據驗證。
Tier 2數據驗證：第二個人對記錄本和報告中的所有結果進行數據驗證，并標記為“已讀并驗證”。如有需要，可以重新處理部分原始數據以抽查數據分析的準確性。如果實驗記錄本（紙質或電子）與原始記錄不同，則需將實驗記錄本與原始記錄進行核對。報告中的所有數據都需追溯到實驗記錄本。此外，從報告到提交文件的數據轉錄也必須進行驗證。必須有100%的信心，確保第三方審查者或檢查員可以從提交文件追溯到報告再到實驗記錄本，而不必擔心數據完整性。同行評審必須進行記錄和驗證。
電子數據收集和數據分析的準確性與完整性
Tier 1和Tier 2：研發活動中，設備硬件記錄的原始數據準確性通常依賴于設備供應商提供的數據收集軟件。盡管這些研發活動的數據收集和分析軟件不需要符合21 CFR Part 11法規，但實驗室可以基于風險制定控制措施，以確保數據完整性。例如，某些研發儀器系統和數據分析軟件可能被多名分析人員用于不同研究。對于共享儀器，可以接受使用單一實驗室級別的登錄名和密碼訪問系統，類似于設置單一管理員登錄名和密碼。這在多個用戶需要在同一天內訪問同一儀器且避免被其他用戶鎖定時特別高效。
然而，在這些情況下，必須通過一定措施在每次使用時記錄使用系統的分析人員身份，確保與實驗相關的元數據中包含該信息。無論采用何種管理或程序性控制策略，共享研發儀器和軟件應用的每次登錄和使用細節都必須記錄在文檔系統中（例如電子或紙質實驗記錄本），以便將電子數據位置、元數據和結果與執行工作的分析人員關聯起來。
數據收集后，通常需要進一步處理以獲得更準確和精確的結果。例如，色譜和光譜數據通常會被截斷和/或基線校正，以去除不必要的數據點和系統性干擾。隨后，數據會通過適合的數據分析軟件（可能是設備供應商提供的、第三方分析軟件或內部開發）進行進一步處理和/或轉換。在數據轉換過程中，必須避免以任何方式刪除或操縱研發數據，以免無意中引入數據解釋的偏差。
允許的數據轉換操作包括：1）截斷色譜數據中的流穿和洗滌部分；2）插值、外推和平滑處理，以增強數據分析而不掩蓋關鍵數據；3）x軸和y軸平移，以對齊峰并便于更直接的數據可視化和比較；4）x軸和y軸數據歸一化，即通過適當算法減去背景基線斜率或曲率，以改善與參比物質的視覺/化學計量比較，而不掩蓋相關峰。
禁止的數據轉換操作包括：1）偽造、操縱、篡改或刪除數據以通過規格或驗收標準；2）故意誤導結果解釋；3）縮放數據以掩蓋可能的關鍵屬性或雜質；4）調整系統輸入或校準常數以獲得期望結果；5）隱藏或消除原始結果。
數據分析軟件可以是設備供應商提供的、第三方軟件（例如Excel、Sedfit等），或者是內部開發的腳本（如VBA、Python、Matlab等）。
Tier 1：數據收集和分析的審計追蹤在此階段不是必需的。建議每季度進行一次數據存檔。設備操作程序較為靈活，不需要在操作前進行文檔化，但應在實驗記錄本中記錄足夠信息以便后續重現操作。
Tier 2：推薦對電子實驗記錄本中的數據進行審計追蹤。數據、元數據和補充電子文件可以更頻繁地備份（至少每月一次）。如果對數據進行了轉換，應記錄轉換描述，并存儲原始數據和轉換后的數據（以及重要的中間轉換結果）。
例如，在處理凝膠圖像時，操作人員可能通過適當軟件增強對比度，然后再次使用相同或不同的軟件比較條帶密度。在這種情況下，應存儲原始凝膠圖像、增強后的凝膠圖像以及條帶密度定量結果。應在設備操作標準操作程序（SOP）或適用的產品特定SOP（例如方法程序）中實施工程和/或程序性控制，以確保設備操作正確且數據分析具有必要的準確性。對操作程序的任何修改都應在實驗記錄本和適用的技術報告中記錄。
再例如，肽圖譜-質譜數據在高分辨率儀器上單個樣本運行的數據量可能超過1 Gb。用于驗證特定肽序列的數據可能包括母離子峰質量、碎片峰質量以及每種電荷狀態（m/z值）。這種類型的數據處理需要大量的專業知識，有時還需要定制軟件。要求第二位分析人員獨立驗證這種分析中的每一個數據點是不切實際的，但關鍵數據應在技術總結報告中記錄，并在Tier 2中進行數據驗證.
研發活動質量風險層級分配
鑒于將分級系統應用于CMC R&D活動仍可能存在一定的模糊性，以下提供了一些示例。
“階段適宜”的質量體系（phase-appropriate quality systems）是cGMP中固有的一部分，同樣地，某些CMC R&D研究也可以考慮“階段適宜”的質量要求。我們推薦的研發質量體系嚴格程度是基于在產品開發的不同階段，不準確的支持性信息可能對整體產品開發決策帶來的風險水平。
結構與功能表征、雜質鑒定與表征、產品質量屬性確定
生物制品的結構與功能表征是CMC開發的一部分，如ICH Q6B所規定，并在IND文件、BLA/MAA以及某些獲批后的變更中提交給監管機構。到開發后期，藥物原液和藥物制劑在ICH貨架期穩定性研究中觀察到的降解產物也應通過分析方法進行鑒定和表征。盡管基因治療和細胞治療產品有時比蛋白更復雜，但它們也應進行某種程度的適當的結構和功能表征。這些表征活動是識別關鍵質量屬性（CQA）的基礎。
蛋白質、糖類、寡核苷酸、細胞產品和其他藥物形式的生化和生物物理結構的闡釋在技術上具有挑戰性，需要使用數十種分析技術。許多用于結構闡釋和產品降解產物表征的方法是前沿研發技術，例如高級質譜和光譜技術，這些技術通常由高度專業化的實驗室運行。先進療法通常使用電子顯微鏡或其他基于圖像的物理分析系統來評估結構元素。
用于功能屬性表征的方法也高度專業化，包括表面等離子共振、生物層干涉測量、電化學發光等先進技術。即使是傳統的功能分析方法（如基于細胞的生物測定）通常也用于專門的R&D研究，例如結構/功能關系的表征。
通常，多種方法被用于鑒定產品結構和降解產物。例如，初級序列通常通過確認基因序列、完整質量、多波長紫外檢測的肽圖譜以及質譜檢測來確定。
在大多數情況下，結構和功能研究或雜質表征的研究是定性的。
產品強制降解研究
對藥物原液或制劑施加針對性的壓力條件（如高溫、高/低pH值、氧化、光照、攪拌等）可以揭示潛在的降解路徑和產品風險，實現不同處方或生產工藝條件下的降解模式的定性比較。這些研究根據研究的性質可能屬于Tier 1或Tier 2級。
產品標準品的建立、穩定性與橋接
在生產和測試操作中，會使用多種類型的標準品和原材料。與藥典方法相關的標準品（如原材料和輔料）通常從商業來源獲取，這些商業供應商負責其生產、校準、認證和穩定性。不過，即使存在外部認證的生物制品參考標準，也期望每個制造商使用這些標準來建立自己生產過程中的內部標準。
在早期產品開發階段，產品標準品批次可能會采用單層級的臨時參考標準體系進行管理。“單層級”意味著標準品直接用于QC測試，當需要新的標準品時，會將其與上一批次標準品進行對比驗證。這種做法通常在短期內使用，且標準品批次的變化有限，因為長期使用單層級系統可能導致標準品出現不期望的漂移。
為了降低這種風險，在生物制品的質量控制和產品開發中，標準品（參考標準）的管理通常采用雙層級體系，以確保產品質量的一致性和穩定性。雙層級標準品體系包括主參考標準（Primary Reference Standard）和工作參考標準（Working Reference Standard）。主參考標準：由一個特定的產品批次經過嚴格驗證后確定，作為最高級別的參考標準，用于校準和驗證其他批次的標準品。工作參考標準：由另一個不同的產品批次經過主參考標準校準后確定，用于日常的QC測試。
分析方法開發與方法資質認證
R&D分析實驗室測試方法可能來自藥典（產品專論或通用方法），也可能是全新開發的（非藥典方法）。用于QC產品放行和穩定性研究的方法需遵循階段適宜的藥典方法驗證或非藥典方法驗證。所有QC方法（藥典或非藥典）都必須在其將被使用的cGMP實驗室中驗證其適用性。
關鍵非cGMP研究包括參考標準表征和橋接研究、用于PPQ支持的增強分析、后期和獲批后的分析可比性研究，以及生物類似藥產品的比較分析評估（CAA）需要使用適當資質認證的方法。實際上，對于生物類似藥產品，FDA期望R&D方法資質認證包與cGMP QC方法的驗證包一起提交。
盡管沒有公開的 “方法資質認證”官方定義，但實際區別在于，方法資質認證研究包括ICH Q2諸多參數（如準確性、精密度、線性、特異性、檢測限/定量限等），而方法驗證研究則在預定義的接受標準內確認這些參數。資質認證數據通常用于通過展示ICH Q2參數的固有性能范圍來幫助設定方法驗證接受標準。資質認證數據也有助于通過展示相同材料的重復測量的精密度程度，為可比性研究和CAA中定量屬性的最低接受標準范圍提供依據。
Tier 1：R&D分析實驗室應遵循Tier 1級的實驗室建議，進行方法性能研究，以評估方法性能能力，并支持早期階段的工藝和產品表征及可比性研究。
Tier 2：R&D分析實驗室應遵循Tier 2級的實驗室建議，進行方案驅動的方法資質認證研究、工藝可比性研究和CAA研究。由于這些是方案驅動的研究，任何偏差都應在報告中記錄，未能達到接受標準的情況應進行調查，并對任何重新測試進行合理說明。
上游/下游工藝開發
上游和下游工藝開發涵蓋了產品開發全生命周期中的廣泛內容。通常臨床前工藝開發范圍有限，目標是生產純度高且安全的藥物，用于在體外和體內動物模型中測試生物學效應。即使毒理學研究供試品也不需要GMP，不過可以為首次人體臨床試驗的cGMP生產材料提供支持。隨著藥物進入I期至III期臨床階段，通常開始更加深入地研究生產工藝相關的操作參數和性能參數，遵循質量源于設計（QbD）原則，以確保藥物原液和制劑在鑒別、效力（強度）、質量和純度方面達到可接受的限度。
Tier 1：工藝開發實驗室應遵循Tier 1的實驗室建議，用于上游和下游工藝的開發/優化、藥物原液凍融穩定性研究以及大多數早期階段開發活動等。
Tier 2：晚期小規模工藝模型（SSM）的資格認證；Limit of In Vitro Cell Age（LIVCA）研究；unit operations的參數運行范圍（PARs）和正常運行范圍（NORs）評估；下游清除工藝研究；色譜柱清潔和使用壽命研究；工藝驗證研究（保留時間研究、in use studies、可提取物和可浸出物測試等）。所有這些活動都應遵循Tier 2的要求。由于生產用主細胞庫（MCB）/工作細胞庫（WCB）或主病毒庫（MVB）/工作病毒庫（WVB）對cGMP生產有直接影響，其表征應采用Tier 2的合規性要求。
制劑處方開發
初步制劑處方開發研究通常與分析方法和工藝開發研究同步進行，因此可能早于cGMP方法的實施。這些研究中使用的材料可能來自不同的工藝。為了能夠從任何早期制劑處方開發研究中得出可靠的結論，有必要記錄原材料和試劑的批號、SOP編號，或者在沒有SOP的情況下，在制劑處方開發方案和/或報告中記錄分析方法的詳細信息。
早期制劑處方開發研究分階段進行，從篩選多種條件的前處方研究開始，接著是對有潛力的處方進行優化研究，最后是對候選處方進行長期儲存研究。所采用的大多數方法與產品放行和穩定性測試的方法一致。
由于制劑處方開發研究是比較性研究，通常在同一個分析批中測試某一時間點的樣品，這些研究在方法和儀器資質認證以及系統適用性等方面的要求相對寬松。因此，早期制劑處方開發研究可能屬于Tier 1級。隨著分析方法的鎖定，制劑開發會陸續進入Tier 2，甚至對于擬用于放行或穩定性表征的分析方法，可能需要完全符合cGMP要求。
制劑處方開發并不一定在I期臨床試驗之前停止。臨床劑量和其他因素可能需要對配方濃度、給藥途徑或給藥裝置進行更改，以增強患者的舒適性和/或依從性。當然，大致的研究步驟是相同的，從篩選開始，然后是優化，接著是長期研究，可能在實驗室中開展即可，而不需要在QC/cGMP環境中進行。然而，最終的確認性研究，可能會記錄在可比性評估中，將需要對放行和穩定性方法應用完整的cGMP。
制劑工藝開發
制劑工藝開發研究通常包括drug product handling studies和可提取物/可浸出物研究。drug product handling studies涉及藥品與容器、給藥裝置、輸液袋/管道的相容性表征，使用中的穩定性研究，光穩定性確認研究，運輸穩定性研究等。可提取物和可浸出物研究用于識別容器/封閉系統中潛在的可提取化合物。這些研究包括開發/驗證用于檢測可提取化合物的研發方法，以及在容器封閉系統中對產品基質進行實時可浸出物研究。
Tier 1：包括PPQ之前的（包括IND階段）drug product handling studies。
Tier 2：包括PPQ之后的drug product handling studies和使用中的微生物挑戰研究。
來源：藥理毒理開發
