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奶制品中鹽酸克倫特羅(瘦肉精)檢測的固相萃取方法

嘉峪檢測網        2016-11-18 09:06

瘦肉精檢測咨詢:400-9700-076

 

 

一、 前言

       鹽酸克倫特羅又稱瘦肉精,是一種腎上腺類神經興奮劑。如果作為飼料添加劑被豬等動物食用后,能促進蛋白質的合成、加速脂肪的轉化和分解,從而提高豬肉的瘦肉率。然而,含有“鹽酸克倫特羅”的豬肉一旦被人食用,會引發心悸、肌肉顫動、頭暈、乏力等急性中毒癥狀。因此,我國自2002年9月10日起,禁止在飼料和動物飲用水中使用鹽酸克倫特羅。

表1  鹽酸克倫特羅樣品信息

奶制品中鹽酸克倫特羅(瘦肉精)檢測的固相萃取方法

 

二、適用范圍

       適用于牛奶、奶粉中鹽酸克倫特羅的檢測。

三、實驗部分

儀器、試劑與材料

主要儀器設備

       高效液相色譜儀,紫外檢測器,SPE固相萃取裝置,氮氣吹干儀,超聲清洗儀,渦旋振蕩儀,離心機。

試劑材料

       市售濃縮牛奶;鹽酸克倫特羅標品;Ⅰ級蒸餾水;甲醇(色譜純);三氯乙酸、乙酸鉛、三氯甲烷、氨水(均為分析純)。

色譜柱:ZKAT-C18(5 μm,120 Å,4.6×250 mm,訂貨號:152200542)

SPE柱:AE.SPE-MCX(500 mg/6 mL)

 

四、樣品制備

樣品提取

       準確量取2 mL牛奶于50 mL離心管中,加入5 mL三氯乙酸水溶液(10 g/L),充分振蕩;加入2 mL乙酸鉛水溶液(22 g/L)和2 mL三氯甲烷,充分混合2 min;4000 r/min轉速離心5 min,收集上清液;殘渣中加入5 mL三氯乙酸水溶液(10 g/L)和2 mL乙酸鉛水溶液(22 g/L),重復提取一次,合并提取液待凈化。

奶制品中鹽酸克倫特羅(瘦肉精)檢測的固相萃取方法

SPE柱凈化

(1)活化:PXC固相萃取柱使用前依次用6 mL甲醇、6 mL水活化。

(2)上樣:將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中,以2 mL/min的流速過柱,棄去濾液。

(3)淋洗:用6 mL甲醇、6 mL水淋洗固相萃取柱,棄去淋洗液。

(4)洗脫:用6 mL 5%氨水甲醇溶液洗脫固相萃取小柱,收集洗脫液。

(5)重新溶解:洗脫液于45℃氮吹吹干,用流動相定容至1 mL,0.45 μm微孔濾膜過濾,供HPLC測定。

五、添加回收結果

牛奶基質中鹽酸克倫特羅添加水平(2.5 mg/kg)的回收結果

表2  牛奶基質中鹽酸克倫特羅添加水平(2.5 mg/kg)的回收結果

 

奶制品中鹽酸克倫特羅(瘦肉精)檢測的固相萃取方法

奶制品中鹽酸克倫特羅(瘦肉精)檢測的固相萃取方法

圖1  添加水平為2.5 mg/kg牛奶基質中鹽酸克倫特羅的液相色譜圖

 

 

液相色譜條件

色 譜 柱:ZKAT-C18(250 * 4.6 mm,5 μm)

檢 測 器:UV3000型紫外/可見光檢測器

檢測波長:UV 244 nm

流 動 相:乙腈/磷酸二氫鉀水溶液*(v/v=30/70)

流    速:1.0 mL/min

柱    溫:30 ℃

進 樣 量:20 μL

*磷酸二氫鉀水溶液(10 mmol/L,pH = 3.0)

 

六、結論

        采用此方法進行奶制品中鹽酸克倫特羅含量的液相測試,添加回收率達到100.29%,表明AE.SPE-PXC 及ZKAT-C18適于乳制品中鹽酸克倫特羅的純化和測試。

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來源:色譜早知道

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