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嘉峪檢測網 2016-11-18 09:06
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一、 前言
鹽酸克倫特羅又稱瘦肉精,是一種腎上腺類神經興奮劑。如果作為飼料添加劑被豬等動物食用后,能促進蛋白質的合成、加速脂肪的轉化和分解,從而提高豬肉的瘦肉率。然而,含有“鹽酸克倫特羅”的豬肉一旦被人食用,會引發心悸、肌肉顫動、頭暈、乏力等急性中毒癥狀。因此,我國自2002年9月10日起,禁止在飼料和動物飲用水中使用鹽酸克倫特羅。
表1 鹽酸克倫特羅樣品信息
二、適用范圍
適用于牛奶、奶粉中鹽酸克倫特羅的檢測。
儀器、試劑與材料
主要儀器設備
試劑材料
市售濃縮牛奶;鹽酸克倫特羅標品;Ⅰ級蒸餾水;甲醇(色譜純);三氯乙酸、乙酸鉛、三氯甲烷、氨水(均為分析純)。
色譜柱:ZKAT-C18(5 μm,120 Å,4.6×250 mm,訂貨號:152200542)
SPE柱:AE.SPE-MCX(500 mg/6 mL)
四、樣品制備
樣品提取
準確量取2 mL牛奶于50 mL離心管中,加入5 mL三氯乙酸水溶液(10 g/L),充分振蕩;加入2 mL乙酸鉛水溶液(22 g/L)和2 mL三氯甲烷,充分混合2 min;4000 r/min轉速離心5 min,收集上清液;殘渣中加入5 mL三氯乙酸水溶液(10 g/L)和2 mL乙酸鉛水溶液(22 g/L),重復提取一次,合并提取液待凈化。
SPE柱凈化
(1)活化:PXC固相萃取柱使用前依次用6 mL甲醇、6 mL水活化。
(2)上樣:將待凈化液加入已活化好的固相萃取柱中,以2 mL/min的流速過柱,棄去濾液。
(3)淋洗:用6 mL甲醇、6 mL水淋洗固相萃取柱,棄去淋洗液。
(4)洗脫:用6 mL 5%氨水甲醇溶液洗脫固相萃取小柱,收集洗脫液。
(5)重新溶解:洗脫液于45℃氮吹吹干,用流動相定容至1 mL,0.45 μm微孔濾膜過濾,供HPLC測定。
五、添加回收結果
牛奶基質中鹽酸克倫特羅添加水平(2.5 mg/kg)的回收結果
表2 牛奶基質中鹽酸克倫特羅添加水平(2.5 mg/kg)的回收結果
圖1 添加水平為2.5 mg/kg牛奶基質中鹽酸克倫特羅的液相色譜圖
液相色譜條件
色 譜 柱:ZKAT-C18(250 * 4.6 mm,5 μm)
檢 測 器:UV3000型紫外/可見光檢測器
檢測波長:UV 244 nm
流 動 相:乙腈/磷酸二氫鉀水溶液*(v/v=30/70)
流 速:1.0 mL/min
進 樣 量:20 μL
*磷酸二氫鉀水溶液(10 mmol/L,pH = 3.0)
六、結論
采用此方法進行奶制品中鹽酸克倫特羅含量的液相測試,添加回收率達到100.29%,表明AE.SPE-PXC 及ZKAT-C18適于乳制品中鹽酸克倫特羅的純化和測試。
來源:色譜早知道