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技巧一：10倍(10-1)稀釋度的制備

在《GB4789.2-2022食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 菌落總數(shù)測定》中，第6點“菌落總數(shù)的檢驗程序”中“檢樣”步驟是25g（mL）+225mL稀釋液，制成10倍稀釋度，也即10-1。在“6.1.5根據(jù)對樣品污染狀況的估計,擇1個~3個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)”在這里說明，液體樣品可包括原液。那么問題來了，當我們做選取原液、10倍兩個稀釋度時，怎么操作呢？是接原液和25mL+225mL稀釋液嗎？如果這樣操作，原液和10倍兩個稀釋度的誤差會很大，操作也比較麻煩。

在實踐過程中，當我們樣品是液體時，10倍稀釋度應該取1mL+9mL稀釋液，而不是25mL+225mL。這樣既方便，又準確。只有固體、半固體樣品才需要按照25g+225mL制備10倍稀釋度。

關于配制10-1稀釋度那個配制，我們做實驗的時候會明顯覺得10-1稀釋度的結果明顯不是10-2稀釋度結果的10倍，有時候還會差得有點明顯，這些都是系統(tǒng)誤差和人的操作造成的，所以我還是建議按照25+225，而且25是1次就量取好不要搞什么10+10+5甚至更多次。如果都是用移液槍的話感覺可以考慮這個方法，移液管的就算了，還是按照標準方法來。

技巧二：選取適宜稀釋度

如何選取適宜稀釋度呢？

在“6.1.5根據(jù)對樣品污染狀況的估計,選擇1個~3個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)”這里說了，“對樣品污染狀況的估計”，怎么樣估計才準確呢？如果能估計的話，那還用檢測嗎？“選擇1個~3個適宜稀釋度”，到底選擇1個，2個,還是三個呢？很多檢驗員未必搞清楚。

在實踐過程中，我們總結了經(jīng)驗。這個“對樣品污染狀況的估計”可以根據(jù)產(chǎn)品標準的要求和企業(yè)內控指標要求進行選取即可。這個怎么理解呢？根據(jù)GB4789.2-2022,菌落計數(shù)是選取菌落數(shù)在30-300之間的平皿進行計數(shù)。結合產(chǎn)品標準要求，以能出檢測報告為依據(jù)。

我們檢測樣品的菌落數(shù)的目的是看看樣品的菌落總數(shù)是否超標。所以，應以稀釋度最低的平皿的菌落數(shù)能檢測超標的即可。

例如，某食品菌落總數(shù)要求是：n=5，c=2，m=10000，M=100000。我們假設最低稀釋度平皿上長了300。那么，10000/300=33，兩位數(shù)。即最低稀釋度選取10-2即可，這樣稀釋度選10-2、10-3即可。

假如10-2上菌落數(shù)超過300，即多不可計了。那么，至少是100*300=30000，已經(jīng)大于m=10000。檢出3個大于30000的，可判超標。

如果最低稀釋度上菌落數(shù)小于30或者無生長。那么，檢測結果也是合格的。

例如，最低稀釋度上無菌落生長，可報告<100。如果有生長，直接報告實數(shù)即可，結果也合格。