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       隨著社會(huì)的發(fā)展，乳制產(chǎn)品的種類也在日益豐富和多樣化，如人體所需要的嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌、干酪乳桿菌、嗜熱乳鏈球菌和保加利亞乳桿菌等也都通常被作為重要成分加入到各種乳產(chǎn)品當(dāng)中。乳制品被人體攝入之后，其中包含的活性菌也同時(shí)進(jìn)入到人體內(nèi)部消化系統(tǒng)，它們能夠幫助平衡腸胃功能健康，抑制對(duì)人體有害的各類細(xì)菌繁殖，能夠顯著提高人的身體健康水平。

       但這種效果不是隨便攝入的活性菌就能夠起到作用，而是需要攝入人體內(nèi)的活性菌達(dá)到一定的數(shù)量才能夠有效發(fā)揮。經(jīng)檢驗(yàn)表明，人體內(nèi)部活性菌數(shù)量要達(dá)到97cfu/ g (m L)以上才能夠具有明顯效果。實(shí)際上，市場(chǎng)上出售的各種乳制品的研究分析發(fā)現(xiàn)，大多產(chǎn)品中的包含的乳酸菌的活躍度與濃度都嚴(yán)重偏低，這一方面是由于生產(chǎn)企業(yè)不負(fù)責(zé)任所導(dǎo)致，另一方面也與當(dāng)缺乏一種行之有效的活性乳酸菌檢測(cè)方式及其方法有關(guān)，因此也不難理解當(dāng)前市面上為什么存在那么多含超低乳酸菌的乳制品。

顯微鏡下的乳酸菌

       當(dāng)前，對(duì)于嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌等計(jì)數(shù)方法已有一些研究文獻(xiàn)，但都不是在其純度較低條件下的計(jì)數(shù)方法，關(guān)于其他菌類計(jì)數(shù)方面的研究也有學(xué)者嘗試過，但并沒有取得突破性進(jìn)展。對(duì)此，在已有的研究文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，總結(jié)了一種新的非純度條件下對(duì)活性菌計(jì)數(shù)的方法，能夠有效針對(duì)嗜酸乳桿菌、雙歧桿菌、干酪乳桿菌、嗜熱乳鏈球菌和保加利亞乳桿菌進(jìn)行科學(xué)合理的定量分析，為提高奶制品品質(zhì)提供可靠度科學(xué)測(cè)量工具。  

實(shí)驗(yàn)供試菌種：

嗜熱乳鏈球菌( S t r e p t o c o c c u st h e r m o p h i l u s , S T )

保加利亞乳桿菌( L actobacil lus delbr ueckii ssp.bulgaricus,LB)

嗜酸乳桿菌( Lactobacill u s a c i d o p h i l u s , L A)

雙歧桿菌( Bif idobacter ia, BB)

干酪乳桿菌(Lactobacillus casei , LC)

實(shí)驗(yàn)所需儀器：

厭氧培養(yǎng)箱

厭氧培養(yǎng)罐

好氧培養(yǎng)箱

實(shí)驗(yàn)待檢驗(yàn)樣品：

1、已知菌樣品：

以脫脂乳為培養(yǎng)基,在所需培養(yǎng)條件下分別培養(yǎng)供試的5種菌,即為已知菌待檢樣品。

2、已知乳品樣品：

為市售酸乳或乳酸菌發(fā)酵乳飲料,均含有活性乳酸菌，即為已知乳品樣品。

實(shí)驗(yàn)過程分析：

嗜熱乳鏈球菌、保加利亞乳桿菌、嗜酸乳桿菌和雙歧桿菌對(duì)糖的利用情況：

將M R S瓊脂培養(yǎng)基中的葡萄糖分別以柳醇、纖維二糖、果糖、甘露醇、山梨醇等糖類代替,配制成系列不同的M R S瓊脂培養(yǎng)基,并制成平板,分別接種ST、LB、LA和BB菌株,在所需條件下培養(yǎng),觀測(cè)平板上菌落的生長(zhǎng)情況。僅LA可以利用柳醇,故MRS-柳醇瓊脂培養(yǎng)基可用于L A的選擇計(jì)數(shù)。當(dāng)柳醇質(zhì)量濃度為0. 5%時(shí), LA便可形成大小合適的菌落。另外, M R S-纖維二糖瓊脂、MRS-甘露醇瓊脂和MRS-山梨醇瓊脂也可用于LA的計(jì)數(shù)。不同培養(yǎng)基平板上ST、LB、LA、BB和LC形成的菌落數(shù)檢測(cè)結(jié)果，按照最先進(jìn)的方法制成十種各不相同的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基,并制成平板,分別接種ST、LB、LA、BB和LC的純培養(yǎng)菌株,觀察檢測(cè)菌落的形成和數(shù)量，并分別做好相關(guān)試驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄。

實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果分析：

s T-瓊脂和M17-瓊脂適合嗜熱乳鏈球菌的計(jì)數(shù)

L C-瓊脂適合干酪乳桿菌的計(jì)數(shù)

M R S- N N L P瓊脂適合雙歧桿菌的計(jì)數(shù)

MRS- pH5. 2瓊脂適合保加利亞乳桿菌的計(jì)數(shù)

MRS-柳醇瓊脂、MRS-山梨醇瓊脂、MRS-核糖瓊脂和MRS-葡萄糖酸鹽瓊脂均可用于LA和LC的計(jì)數(shù),但因LC-瓊脂培養(yǎng)基能抑制LA和BB的生長(zhǎng),從而適宜于L C的選擇計(jì)數(shù),因此當(dāng)產(chǎn)品中只有L A和LC存在時(shí),可用LC-瓊脂測(cè)定LC的菌落數(shù),再用MRS-柳醇瓊脂或MRS-山梨醇瓊脂或MRS-核糖瓊脂或MRS-葡萄糖酸鹽瓊脂測(cè)其總數(shù),兩者之差即為L(zhǎng) A的數(shù)量。對(duì)市面上出售的乳制品進(jìn)行抽樣檢測(cè)，從檢測(cè)結(jié)果分析來(lái)看：所選的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件適合對(duì)S T、L B、L A和B B的選擇計(jì)數(shù),對(duì)照樣品的檢測(cè)結(jié)果接近實(shí)際菌數(shù),同時(shí)還發(fā)現(xiàn)除了對(duì)照樣品和加LA與BB的酸乳中LA和BB的數(shù)量較高外,其它市售酸乳中含的LA和BB菌數(shù)均較低。

實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

通過實(shí)驗(yàn)，對(duì)含活性乳酸菌乳制品中不同活性菌的計(jì)算方法進(jìn)行嘗試，取得了不錯(cuò)的試驗(yàn)效果。并發(fā)現(xiàn)，用R I-瓊脂培養(yǎng)基來(lái)分離熱乳鏈球菌能夠收到顯著效果;可用K L-乳酸菌培養(yǎng)基來(lái)分離干酪乳桿菌;用NG V-MMWN氨基培養(yǎng)基分離雙歧桿菌; N L H-p C7.1碳酸培養(yǎng)基分離和提取保加利亞乳桿菌; NUL-氧脂酸分離和提取嗜酸乳桿菌和干酪乳桿菌;如果1只需要提取和分離嗜酸乳桿菌和干酪乳桿菌,則可在計(jì)算其總數(shù)量之后，在用N L-碳酸基培養(yǎng)基分離干酪乳桿菌數(shù),剩余即為嗜酸乳桿菌數(shù)量。