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諾如病毒，又稱諾瓦克病毒，可感染人和動物引起急性腸胃炎、冬季嘔吐性疾病、胃腸性流感等，是非細菌性胃腸炎的主要病原體之一。

諾如病毒是一種單鏈RNA病毒，主要分為6個基因型（GI-GVI），其中常見的世界性流行諾如病毒基因型主要為GI和GII。

諾如病毒最初是通過電鏡檢測發(fā)現(xiàn)的，因此最初的諾如病毒診斷方法主要是電鏡法（EM）與免疫電鏡法（IEM），通過電鏡觀察病毒粒子的形態(tài)來確認，需要的病毒濃度較高（一般電鏡法需要病毒濃度約為106病毒粒子/mL，免疫電鏡法靈敏度比普通電鏡法要高10倍左右），因此靈敏度與特異性相對較低，并且只能夠在比較專業(yè)的檢測機構(gòu)才能進行，無法進行普及。

隨著人們對諾如病毒的不斷研究，免疫法逐漸被用來檢測諾如病毒。免疫法主要有放射免疫法（RIA）、生物素-親和素免疫法（Biotin-Avidin Immunoassy）以及酶聯(lián)免疫法（ELISA）。RIA的靈敏度要比IEM高10-100倍，但需要使用放射元素進行標(biāo)記，且需要時間較長（6d）；Biotin-Avidin Immunoassy是美國疾病預(yù)防控制中心基于RIA建立的簡化方法，靈敏度與RIA相近；ELISA具有靈敏度高、耗時少、經(jīng)濟的優(yōu)點，便于廣泛推廣，但株型特異性太強，應(yīng)用范圍較狹窄。

分子生物學(xué)的飛速發(fā)展，帶來了多種更加靈敏、特異、快速的核酸檢測方法，包括等溫核酸擴增（NASBA）、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）、熒光染料RT-PCR、熒光探針RT-PCR、多重RT-PCR等，是目前檢測諾如病毒應(yīng)用最廣泛的方法，被稱為檢測諾如病毒的“金標(biāo)準(zhǔn)”。NASBA直接擴增RNA來進行檢測，儀器相對簡便，通過瓊脂糖凝膠電泳、印跡雜交或者熒光檢測來鑒定結(jié)果，靈敏度低于RT-PCR；RT-PCR通過逆轉(zhuǎn)錄RNA模板、PCR擴增特異性產(chǎn)物，使用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定結(jié)果；熒光染料RT-PCR通過向RT-PCR反應(yīng)體系中添加非特異性的熒光染料，可以在反應(yīng)過程中監(jiān)測擴增產(chǎn)物的生成量，但需要做熔解曲線分析來確定反應(yīng)的特異性；熒光探針RT-PCR通過特異性的熒光探針與引物，可實時監(jiān)控反應(yīng)過程中特異性產(chǎn)物的變化，并且可以實現(xiàn)同一管中多個基因的檢測（多重），特異性較好，假陽性率低，檢測靈敏度可達10-100拷貝/反應(yīng)，可用于取代普通RT-PCR。

在核酸檢測中，有幾個因素影響檢測結(jié)果。由于諾如病毒無法像常規(guī)致病菌那樣經(jīng)過簡單增菌進行擴增，只能通過在樣本中的富集來提高其濃度，因此樣本處理以及病毒富集濃縮是檢測的關(guān)鍵。目前樣本中諾如病毒的富集濃縮主要有兩種方式，固體樣本以及粘度較高的液體樣本可以使用PEG沉淀法，水以及粘度較低的液體樣本可以使用膜過濾法。富集后的樣本經(jīng)過核酸提取（試劑盒或其他方法）得到核酸，其完整程度和純度對下一步的核酸檢測有較大的影響。

Real-Time RT-PCR技術(shù)的應(yīng)用，不僅能夠快速、特異的檢測低濃度的諾如病毒感染，而且能夠同時檢測諾如病毒、星狀病毒和輪狀病毒等，操作相對簡便，減少了整個檢測過程中由操作帶來的污染，并且能夠進一步對病毒的基因型進行研究，是未來諾如病毒檢測的發(fā)展趨勢。但復(fù)雜樣品的前處理、低含量樣品的濃縮、病毒變異株的識別以及特異性的提高還有待進一步的研究。