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嘉峪檢測網(wǎng) 2016-05-24 00:10
為加強化妝品監(jiān)管，打擊化妝品非法添加行為，規(guī)范化妝品中禁用物質(zhì)檢測技術(shù)要求，面膜類化妝品中氟輕松檢測方法（高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）（見附件）已由化妝品標(biāo)準(zhǔn)專家委員會審議通過，現(xiàn)予發(fā)布。
特此通告。
附件：面膜類化妝品中氟輕松檢測方法（高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）
食品藥品監(jiān)管總局
2016年5月18日
附件
面膜類化妝品中氟輕松檢測方法
（高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法）
1范圍
本方法規(guī)定了面膜類化妝品中氟輕松的高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法。
本方法適用于面膜類化妝品中氟輕松的定性定量測定。
2方法提要
面膜類化妝品用飽和氯化鈉溶液分散，用乙腈從分散液中提取氟輕松，用亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉淀提取液中大分子基質(zhì)，經(jīng)固相萃取小柱凈化，用高效液相色譜儀分離，質(zhì)譜檢測器檢測，采用保留時間和特征離子對豐度比定性，以待測物質(zhì)相對應(yīng)離子峰面積定量，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計算含量。
本方法的檢出限為0.03 µg/g，定量限為0.05 µg/g。
3試劑和材料
除另有規(guī)定外，本方法所用試劑均為分析純或以上規(guī)格，水為純化水。
3.1甲醇：色譜純。
3.2乙腈：色譜純。
3.3冰醋酸：優(yōu)級純。
3.4飽和氯化鈉溶液。
3.5 10%亞鐵氰化鉀溶液：稱取115 g亞鐵氰化鉀K4Fe(CN)6·3H2O固體，用水溶解定容至1000 mL。
3.6 20%乙酸鋅溶液：稱取239 g乙酸鋅C4H6O4Zn·2H2O固體，用水溶解定容至1000 mL。
3.7Oasis HLB固相萃取小柱或相當(dāng)者：60 mg，3 mL。
3.8 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：氟輕松，純度不小于99.0%；標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的分子式、相對分子質(zhì)量、CAS登錄號、化學(xué)結(jié)構(gòu)圖參見附錄A。
3.9 標(biāo)準(zhǔn)儲備液（ρ=1g/L）：準(zhǔn)確稱取氟輕松標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（3.8）10mg，精確到0.01 mg，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，于－18℃下冷凍保存。
3.10 標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：臨用時，取標(biāo)準(zhǔn)儲備液（3.9）適量，用乙腈稀釋成0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.80μg/mL系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
4儀器和設(shè)備
4.1 高效液相色譜-三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（ESI源）。
4.2 分析天平：感量0.0001g；0.00001g。
4.3 渦旋混合器。
4.4離心機：轉(zhuǎn)速5000r/min，容量10mL；50mL。
4.5 固相萃取裝置。
5分析步驟
5.1樣品處理
5.1.1提取
稱取樣品（帶有載體的面膜，去除載體后取樣）0.2 g，精確至0.0001 g，置15 mL具塞離心管中，加入3 mL飽和氯化鈉溶液（3.4），于渦旋混合器上混合使樣品分散，準(zhǔn)確加入2 mL乙腈，充分渦旋提取2 min，以5000 r/min離心10 min，吸出上層清液置于另一50 mL具塞離心管中，下層溶液用2 mL乙腈重復(fù)提取一次，合并兩次乙腈提取液，向提取液中加入40 mL純化水，混勻，加入10%亞鐵氰化鉀溶液（3.5）0.2 mL，混勻，加入20%乙酸鋅溶液（3.6）0.2 mL，混勻，以5000 r/min離心10 min，取全部上清液待進行凈化處理。
5.1.2凈化
將Oasis HLB固相萃取小柱（3.7）接上固相萃取裝置，小柱預(yù)先依次用甲醇5 mL、水10 mL進行活化。將待凈化的樣品上清液（5.1.1）倒入漏斗，經(jīng)濾紙濾過后，濾液流經(jīng)小柱，待樣品溶液自然流盡后，用10%乙腈水溶液10mL清洗小柱，待清洗液自然流盡后，用吸球吹出小柱中的殘留液。在柱出口處接一10mL具塞離心管，用甲醇4 mL淋洗小柱，待甲醇自然流盡后，用吸球吹出小柱中的殘留液。取下離心管，將接收的甲醇用氮氣吹干，用50%的甲醇水溶液0.2mL重新溶解后測定（或根據(jù)需要的濃度用50%的甲醇水溶液重新溶解定容后測定）。
5.2基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液制備
稱取空白樣品5份（帶有載體的面膜，去除載體后取樣），每份0.2g，精確到0.0001g，置15mL具塞離心管中，分別精密加入各濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（3.10）0.2mL，按樣品處理（5.2）步驟操作，將接收的甲醇用氮氣吹干，用50%的甲醇水溶液0.2mL重新溶解后測定。
5.3 色譜-質(zhì)譜參考條件
5.3.1高效液相色譜參考分析條件
色譜柱：SB C18，50 mm×2.1 mm（內(nèi)徑），1.8μm，或相當(dāng)者；
柱溫：室溫；
高效液相色譜流動相及參考分離條件見表1；
進樣量：5μL。
表1高效液相色譜流動相及參考分離條件
|
時間 / min |
流速 / (mL/min) |
流動相A （水，含0.1%醋酸） |
流動相B （乙腈，含0.1%醋酸） |
|
0 |
0.3 |
68% |
32% |
|
3 |
0.3 |
68% |
32% |
|
12 |
0.3 |
25% |
75% |
|
14 |
0.3 |
25% |
75% |
|
14.1 |
0.3 |
68% |
32% |
|
16 |
0.3 |
68% |
32% |
5.3.2質(zhì)譜檢測參考條件
電離方式：電噴霧電離，ESI（+）
離子噴霧電壓：4 kV；
霧化氣：氮氣，38Psi；
干燥氣：氮氣，流速：12L/min，溫度：350 ℃；
碰撞氣：氬氣；
檢測方式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。
氟輕松的質(zhì)譜測定參考參數(shù)見表2。
表2氟輕松的質(zhì)譜測定參考參數(shù)
|
藥物名稱 |
出峰時間 |
相對分子質(zhì)量 |
母離子（錐孔電壓） |
子離子（碰撞能量）* |
|
氟輕松 |
3.84 min |
452.4882 |
453.3（117 V） |
337.2（13 eV） 121.0（34 eV） |
注：“*”表示選擇穩(wěn)定且無干擾的子離子作為定量離子對。
6測定結(jié)果
6.1 定性判定
在相同實驗條件下測定基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液和樣品溶液，如果樣品溶液中檢出的色譜峰的保留時間與標(biāo)準(zhǔn)溶液中的氟輕松峰的保留時間一致，并且所選擇的兩對子離子的質(zhì)荷比一致，樣品定性離子相對豐度與濃度相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的定性溶液的定性離子的相對豐度進行比較時，相對偏差不超過表3規(guī)定的范圍，則可判定樣品中存在氟輕松。
表3定性判定時相對離子豐度的最大允許偏差
|
相對離子豐度比（k） |
k≥50% |
50%>k≥20% |
20%>k≥10% |
k<10% |
|
最大允許偏差 |
±20% |
±25% |
±30% |
±50% |
6.2定量測定
相同實驗條件下測定基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液和樣品溶液，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，樣品中氟輕松的含量用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，按下式計算含量。
式中：
|
ω |
—— |
樣品中氟輕松含量，μg /g； |
|
ρ |
—— |
由標(biāo)準(zhǔn)曲線計算得到的樣品溶液中氟輕松的濃度，μg/mL； |
|
V |
—— |
樣品定容體積，mL； |
|
m |
—— |
樣品取樣量，g； |
|
D |
—— |
稀釋倍數(shù)（不稀釋則取1）。 |
附錄A
附錄B
來源：食藥監(jiān)總局
