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嘉峪檢測網(wǎng) 2024-10-14 09:07
為了能有效地破碎細胞，并盡可能減少產(chǎn)物的破壞,已發(fā)展了多種細胞破碎的方法，通常可分為機械法和非機械法兩類。
一，機械法
常用的機械破碎方法是基于液相或固相剪切力，這些剪切力可以在高壓勻漿器或機械驅(qū)動的破碎機如膠質(zhì)磨、珠磨等設(shè)備中獲得。在高壓勻漿器中,進入高壓室中的細胞懸浮液被強迫通過一個狹窄的小孔，由于產(chǎn)生液相剪切力引起細胞破碎。在機械驅(qū)動的破碎機中,剪切力是由細胞與設(shè)備中的固體表面間的相互作用產(chǎn)生的,這種剪切力場之間的相互作用較復(fù)雜，目前了解得還不夠深入，工程設(shè)計大多數(shù)靠經(jīng)驗。
1， 高壓勻漿器：高壓漿器是用作細胞破碎的較好的設(shè)備，它是由可產(chǎn)生高壓的正向排代泵和排出閥組成，排出閥具有狹窄的小孔，其大小可以調(diào)節(jié)。細胞漿液通過止逆閥進入泵體內(nèi)，在高壓下迫使其在排出閥的小孔中沖擊,并高速撞擊在撞擊環(huán)上，使細胞得到破碎。在操作方式上,可以采用單次通過勻漿器或多次循環(huán)通過等方式。某些較難破碎的細胞，如小球菌、鏈球菌、群母菌和乳酸桿菌等，以及處于生長靜止期的細胞或通入的細胞濃度較高時，應(yīng)采用多次循環(huán)的方式才能達到較高的破碎率
2， 高速珠磨機：珠磨是另一種常用的機械破碎細胞的方法。利用玻璃小珠與細胞懸浮液一起快速攪拌,由于研磨作用,使細胞獲得破碎。
3， 超聲波振蕩器：超聲波具有頻率高、波長短、定向傳播等特點,通常在15~25kHz的頻率下操作。超聲波振蕩器有不同的類型,常用的為電聲型,它是由發(fā)聲器和換能器組成，發(fā)生器能產(chǎn)生高頻電流，換能器的作用是把電磁振蕩轉(zhuǎn)換成機械振動。超聲波振蕩器又可分為槽式和探頭直接插入介質(zhì)兩種型式，一般破碎效果后者比前者好。超聲波對細胞的破碎作用與液體中空穴的形成有關(guān)。當超聲波在液體中傳播時，液體中的某一小區(qū)域交替重復(fù)地產(chǎn)生巨大的壓力和拉力。由于拉力的作用,使液體拉伸而破裂，從而出現(xiàn)細小的空穴。這種空穴泡在超聲波的繼續(xù)作用下,又迅速閉合，產(chǎn)生一個極為強烈的沖擊波壓力,由它引起的粘滯性漩渦在懸浮細胞上造成了剪切應(yīng)力，促使其內(nèi)部液體發(fā)生流動，而使細胞破碎。超聲波處理細胞懸浮液時,破碎作用受許多因素的影響,如超聲波的聲強、頻率、液體的溫度、壓強和處理時間等，此外介質(zhì)的離子強度、PH值和菌種的性質(zhì)等也有很大的影響。不同的菌種，用超聲波處理的效果也不同,桿菌比球菌易破碎,革蘭氏陰性菌細胞比革蘭氏陽性菌易破碎,酵母菌效果較差。
二，非機械法
適合于破碎微生物細胞的非機械法有多種，包括化學法、酶解法、物理法和干燥法等。
1， 化學法：采用化學試劑處理微生物細胞可以溶解細胞或抽提某些細胞組分。用堿處理細胞，可以溶解除去細胞壁以外的大部分組分。酸處理可以使蛋白質(zhì)水解成游離氨基酸,通常采用6mol/L HCl處理。此外,某些表而活性劑(如洗滌劑)也常能引起細胞溶解或使某些組分從細胞內(nèi)滲漏出來,如對胞內(nèi)的異淀粉酶可加入0.1%十二烷基硫酸鈉或0.4%triton X-100于菌液中,30℃振蕩30小時就能較完全地將異淀粉酶抽提出來，且酶的比活較機械破碎法的高。除上述酸、堿及表面活性劑外,也可采用某些脂溶性有機溶劑,如丁醇、丙酮、氯仿等它們能溶解細胞膜上的脂質(zhì)化合物,使細胞結(jié)構(gòu)破壞,將胞內(nèi)產(chǎn)物抽提出來。但是，這些溶劑容易引起生化物質(zhì)破壞，使用時應(yīng)考慮其穩(wěn)定性，操作要在低溫下進行,處理后，還必須將抽提液中的有機溶劑從生化物質(zhì)中分離回收。
2， 酶解法：酶解法是利用酶反應(yīng)分解破壞細胞壁上特殊的鍵，以達到破壁的目的。酶解的方法可以在細胞懸浮液中加入特定的酶，也可采用自溶作用。應(yīng)用酶解需要選擇適宜的酶和酶系統(tǒng)，并要控制特定的反應(yīng)條件，某些微生物體可能僅在生長的某一階段或生長處于特定的情況下,對酶解才是靈敏的。有時,還需附加其他的處理，如輻射,滲透壓沖擊、反復(fù)凍融等或加金屬整合劑 EDTA,除去與膜蛋白結(jié)合的金屬離了,暴露出對酶解敏感的結(jié)構(gòu)部分,也可利用生物因素以促進活性，變得對酶解作用敏感。
對于微生物細胞，常用的酶是菌酶，它能專一的分解細胞壁上糖蛋白分子的 β(1，4)糖苷鍵，使多糖分解,經(jīng)菌酶處理后的細胞移至低滲溶液中,細胞就會破裂。例如在巨大芽抱桿菌或小球菌懸浮液中加入溶菌酶,很快就產(chǎn)生溶菌現(xiàn)象。除溶菌酶外，還可選用蛋白酶、脂肪酶、核酸酶、透明質(zhì)酸酶等。
自溶作用是利用微生物自身產(chǎn)生的酶來溶菌，而不需外加其他的酶。在微生物代謝過程中,大多數(shù)都能產(chǎn)生一種能水解細胞壁上聚合物的酶，以便生長過程繼續(xù)下去。有時改變其生長的環(huán)境，可以誘發(fā)產(chǎn)生過剩的這種酶或激發(fā)產(chǎn)生其它的自溶酶,以達到自溶目的。影響自溶過程的因素有溫度、時間、pH、緩沖液濃度、細胞代謝途徑等。微生物細胞的自溶常采用加熱法或干燥法。例如,谷氨酸產(chǎn)生菌，可加入0.028mol/L Na2CO3和0.018mol/L NaHCO3 pH10的緩沖液,制成3%的懸浮液,加熱至70℃保溫攪拌20分鐘,菌體即自溶。又如酵母細胞的自溶需在45~50℃溫度下保持12~24小時。
采用抑制細胞壁合成的方法能導(dǎo)致類似于酶解的結(jié)果。某些抗生素如青霉素或環(huán)絲氨酸等,能阻止新細胞壁物質(zhì)的合成。但是抑制劑加入的時間很重要,應(yīng)在發(fā)酵過程中細胞生長的后期加入，只有當抑制劑加入后,生物合成和再生還在繼續(xù)進行,溶胞的條件才是有利的，因為在細胞分裂階段，細胞壁就造成缺陷,即達到溶胞作用。
3， 滲透壓沖擊法：先把細胞放在高滲溶液中(例如一定濃度的甘油或蔗糖溶液)由于滲透壓的作用，細胞內(nèi)水分便向外滲出，細胞發(fā)生收縮,當達到平衡后,將介質(zhì)快速稀釋或?qū)⒓毎D(zhuǎn)入水或緩沖液中，由于滲透壓發(fā)生突然變化,胞外的水分迅速滲入胞內(nèi),使細胞快速膨脹而破裂。
4， 凍結(jié)-融化法：將細胞放在低溫下冷凍(約-15℃),然后在室溫中融化,如此反復(fù)多次，就能使細胞壁破裂。凍結(jié)-融化法破壁的機理有兩方面:一方面在冷凍過程中會促使細胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)破裂，從而增加細胞的親水性能。另一方面,冷凍時胞內(nèi)水結(jié)晶,形成冰晶粒,引起細胞膨脹而破裂。
5， 干燥法：經(jīng)干燥后的菌體，其細胞膜的滲透性發(fā)生變化，同時部分菌體會產(chǎn)生自溶，然后用丙酮、丁醇或緩沖液等溶劑處理時,胞內(nèi)物質(zhì)就會被抽提出來。
干燥法的操作可分空氣干燥、真空干燥、噴霧干燥和冷凍干燥等。酵母菌常用空氣干燥,在25~30℃的熱空氣流中吹干,部分酵母產(chǎn)生自溶,再用水,緩沖液或其他溶劑抽提時，效果就較好。真空干燥適用于細菌，把干燥成塊的菌體磨碎再進行抽提。冷凍干燥適用于制備不穩(wěn)定的生化物質(zhì)，在冷凍條件下磨成粉，再用緩沖液抽提。
三，各種破碎方法的優(yōu)劣和選擇依據(jù)
由上述可見，細胞破碎的方法很多,但是它們的破碎效率和適用范圍不同。其中許多方法僅適用于實驗室和小規(guī)模的破碎,迄今為止,能適用于工業(yè)化的大規(guī)模破碎方法還很少，由于高壓勻漿和珠磨兩種機械破碎方法，處理量大,速度非常快，目前在工業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用最廣泛。
在機械法破碎過程中,由于消耗機械能而產(chǎn)生大量的熱量,使料液溫度升高,而易造成生化物質(zhì)的破壞，這是機械法破碎中存在的共同問題，因此，在大多數(shù)情況下都要采取冷卻措施，對于較小的設(shè)備,可采用冷卻夾套或直接投入冰塊冷卻，但是在大型設(shè)備中熱量的除去是必須考慮的一個主要問題。特別在超聲波處理時，熱量的驅(qū)散不太容易,很容易引起介質(zhì)溫度的迅速上升,這就限制了它的放大使用，因為要輸入很高的能來提供必要的冷卻,在經(jīng)濟上是不合算的。因此，超聲波振蕩法主要適用于實驗室或小規(guī)模的細胞破碎。
非機械法中的化學法和酶法應(yīng)用最廣泛。采用化學法時，特別應(yīng)注意的問題是所選擇的溶劑(酸、堿、表面活性劑和有機溶劑等)對生化物質(zhì)不能具有損害作用,在操作后，還必須采用常規(guī)的分離手段，從產(chǎn)物中除去這些試劑,以保證產(chǎn)品的純凈。酶解法的優(yōu)點是專一性強,發(fā)生酶解的條件溫和，采用該法時必須選擇好特定的酶和適宜的操作條件。由于溶菌酶價格較高，一般僅適用于小規(guī)模應(yīng)用。但是對于酵母細胞壁的破碎，已有應(yīng)用于工業(yè)規(guī)模的報道。自溶法價格較低,在一定程度上能用于工業(yè)規(guī)模,但是，對不穩(wěn)定的微生物容易引起所需蛋白質(zhì)的變性，自溶后的細胞培養(yǎng)液過濾速度也會降低。抑制細胞壁合成的方法由于要加入抗生素，費用也很高。
滲透壓沖擊和凍結(jié)-融解法都屬于較溫和的方法，但破碎作用較弱，它們只適用于細胞壁較脆弱的微生物菌體或者細胞壁合成受抑制、強度減弱了的微生物，它們常與酶解法結(jié)合起來使用，提高破碎效果。
干燥法屬于較劇烈的一種破碎方法，容易引起蛋白質(zhì)或其他組分變性，當提取不穩(wěn)定的生化物質(zhì)時，常加入一些試劑進行保護,如可加入少量還原劑半胱氨酸、硫基乙醇、亞硫酸鈉等。
選擇破碎方法時,需要考慮下列因素:細胞的數(shù)量和細胞壁的強度;產(chǎn)物對破碎條件(溫度、化學試劑、酶等)的敏感性;要達到的破碎程度及破碎所必要的速度等，具有大規(guī)模應(yīng)用潛力的生化產(chǎn)品應(yīng)選擇適合于放大的破碎技術(shù)。同時還應(yīng)把破碎條件和后面的提取步驟結(jié)合起來考慮。在固-液分離中，細胞碎片的大小是重要因素，太小的碎片很難分離除去，因此,破碎時既要獲得高的產(chǎn)物釋放率又不能使細胞碎片太小,如果在碎片很小的情況下才能獲得高的產(chǎn)物釋放率,這種操作條件仍不是合適的,適宜的細胞破碎條件應(yīng)該從高的產(chǎn)物釋放率、低的能耗和便于后步提取這三方面進行權(quán)衡。
為了能有效地破碎細胞，并盡川能減少產(chǎn)物的破壞,已發(fā)展了多種細胞破碎的方法通常可分為機械法和非機械法兩類。
①，機械法
常用的機械破碎方法是基于液相或固相剪切力，這些剪切力可以在高壓勻漿器或機械驅(qū)動的破碎機如膠質(zhì)磨、珠磨等設(shè)備中獲得。在高壓勻漿器中,進入高壓室中的細胞懸浮液被強迫通過一個狹窄的小孔，由于產(chǎn)生液相剪切力引起細胞破碎。在機械驅(qū)動的破碎機中,剪切力是由細胞與設(shè)備中的固體表面間的相互作用產(chǎn)生的,這種剪切力場之間的相互作用較復(fù)雜，目前了解得還不夠深入，工程設(shè)計大多數(shù)靠經(jīng)驗。
1， 高壓勻漿器：高壓漿器是用作細胞破碎的較好的設(shè)備，它是由可產(chǎn)生高壓的正向排代泵和排出閥組成，排出閥具有狹窄的小孔，其大小可以調(diào)節(jié)。細胞漿液通過止逆閥進入泵體內(nèi)，在高壓下迫使其在排出閥的小孔中沖擊,并高速撞擊在撞擊環(huán)上，使細胞得到破碎。在操作方式上,可以采用單次通過勻漿器或多次循環(huán)通過等方式。某些較難破碎的細胞，如小球菌、鏈球菌、群母菌和乳酸桿菌等，以及處于生長靜止期的細胞或通入的細胞濃度較高時，應(yīng)采用多次循環(huán)的方式才能達到較高的破碎率
2， 高速珠磨機：珠磨是另一種常用的機械破碎細胞的方法。利用玻璃小珠與細胞懸浮液一起快速攪拌,由于研磨作用,使細胞獲得破碎。
3， 超聲波振蕩器：超聲波具有頻率高、波長短、定向傳播等特點,通常在15~25kHz的頻率下操作。超聲波振蕩器有不同的類型,常用的為電聲型,它是由發(fā)聲器和換能器組成，發(fā)生器能產(chǎn)生高頻電流，換能器的作用是把電磁振蕩轉(zhuǎn)換成機械振動。超聲波振蕩器又可分為槽式和探頭直接插入介質(zhì)兩種型式，一般破碎效果后者比前者好。超聲波對細胞的破碎作用與液體中空穴的形成有關(guān)。當超聲波在液體中傳播時，液體中的某一小區(qū)域交替重復(fù)地產(chǎn)生巨大的壓力和拉力。由于拉力的作用,使液體拉伸而破裂，從而出現(xiàn)細小的空穴。這種空穴泡在超聲波的繼續(xù)作用下,又迅速閉合，產(chǎn)生一個極為強烈的沖擊波壓力,由它引起的粘滯性漩渦在懸浮細胞上造成了剪切應(yīng)力，促使其內(nèi)部液體發(fā)生流動，而使細胞破碎。超聲波處理細胞懸浮液時,破碎作用受許多因素的影響,如超聲波的聲強、頻率、液體的溫度、壓強和處理時間等，此外介質(zhì)的離子強度、PH值和菌種的性質(zhì)等也有很大的影響。不同的菌種，用超聲波處理的效果也不同,桿菌比球菌易破碎,革蘭氏陰性菌細胞比革蘭氏陽性菌易破碎,酵母菌效果較差。
②，非機械法
適合于破碎微生物細胞的非機械法有多種，包括化學法、酶解法、物理法和干燥法等。
1， 化學法：采用化學試劑處理微生物細胞可以溶解細胞或抽提某些細胞組分。用堿處理細胞，可以溶解除去細胞壁以外的大部分組分。酸處理可以使蛋白質(zhì)水解成游離氨基酸,通常采用6mol/L HCl處理。此外,某些表而活性劑(如洗滌劑)也常能引起細胞溶解或使某些組分從細胞內(nèi)滲漏出來,如對胞內(nèi)的異淀粉酶可加入0.1%十二烷基硫酸鈉或0.4%triton X-100于菌液中,30℃振蕩30小時就能較完全地將異淀粉酶抽提出來，且酶的比活較機械破碎法的高。除上述酸、堿及表面活性劑外,也可采用某些脂溶性有機溶劑,如丁醇、丙酮、氯仿等它們能溶解細胞膜上的脂質(zhì)化合物,使細胞結(jié)構(gòu)破壞,將胞內(nèi)產(chǎn)物抽提出來。但是，這些溶劑容易引起生化物質(zhì)破壞，使用時應(yīng)考慮其穩(wěn)定性，操作要在低溫下進行,處理后，還必須將抽提液中的有機溶劑從生化物質(zhì)中分離回收。
2， 酶解法：酶解法是利用酶反應(yīng)分解破壞細胞壁上特殊的鍵，以達到破壁的目的。酶解的方法可以在細胞懸浮液中加入特定的酶，也可采用自溶作用。應(yīng)用酶解需要選擇適宜的酶和酶系統(tǒng)，并要控制特定的反應(yīng)條件，某些微生物體可能僅在生長的某一階段或生長處于特定的情況下,對酶解才是靈敏的。有時,還需附加其他的處理，如輻射,滲透壓沖擊、反復(fù)凍融等或加金屬整合劑 EDTA,除去與膜蛋白結(jié)合的金屬離了,暴露出對酶解敏感的結(jié)構(gòu)部分,也可利用生物因素以促進活性，變得對酶解作用敏感。
對于微生物細胞，常用的酶是菌酶，它能專一的分解細胞壁上糖蛋白分子的 β(1，4)糖苷鍵，使多糖分解,經(jīng)菌酶處理后的細胞移至低滲溶液中,細胞就會破裂。例如在巨大芽抱桿菌或小球菌懸浮液中加入溶菌酶,很快就產(chǎn)生溶菌現(xiàn)象。除溶菌酶外，還可選用蛋白酶、脂肪酶、核酸酶、透明質(zhì)酸酶等。
自溶作用是利用微生物自身產(chǎn)生的酶來溶菌，而不需外加其他的酶。在微生物代謝過程中,大多數(shù)都能產(chǎn)生一種能水解細胞壁上聚合物的酶，以便生長過程繼續(xù)下去。有時改變其生長的環(huán)境，可以誘發(fā)產(chǎn)生過剩的這種酶或激發(fā)產(chǎn)生其它的自溶酶,以達到自溶目的。影響自溶過程的因素有溫度、時間、pH、緩沖液濃度、細胞代謝途徑等。微生物細胞的自溶常采用加熱法或干燥法。例如,谷氨酸產(chǎn)生菌，可加入0.028mol/L Na2CO3和0.018mol/L NaHCO3 pH10的緩沖液,制成3%的懸浮液,加熱至70℃保溫攪拌20分鐘,菌體即自溶。又如酵母細胞的自溶需在45~50℃溫度下保持12~24小時。
采用抑制細胞壁合成的方法能導(dǎo)致類似于酶解的結(jié)果。某些抗生素如青霉素或環(huán)絲氨酸等,能阻止新細胞壁物質(zhì)的合成。但是抑制劑加入的時間很重要,應(yīng)在發(fā)酵過程中細胞生長的后期加入，只有當抑制劑加入后,生物合成和再生還在繼續(xù)進行,溶胞的條件才是有利的，因為在細胞分裂階段，細胞壁就造成缺陷,即達到溶胞作用。
3， 滲透壓沖擊法：先把細胞放在高滲溶液中(例如一定濃度的甘油或蔗糖溶液)由于滲透壓的作用，細胞內(nèi)水分便向外滲出，細胞發(fā)生收縮,當達到平衡后,將介質(zhì)快速稀釋或?qū)⒓毎D(zhuǎn)入水或緩沖液中，由于滲透壓發(fā)生突然變化,胞外的水分迅速滲入胞內(nèi),使細胞快速膨脹而破裂。
4， 凍結(jié)-融化法：將細胞放在低溫下冷凍(約-15℃),然后在室溫中融化,如此反復(fù)多次，就能使細胞壁破裂。凍結(jié)-融化法破壁的機理有兩方面:一方面在冷凍過程中會促使細胞膜的疏水鍵結(jié)構(gòu)破裂，從而增加細胞的親水性能。另一方面,冷凍時胞內(nèi)水結(jié)晶,形成冰晶粒,引起細胞膨脹而破裂。
5， 干燥法：經(jīng)干燥后的菌體，其細胞膜的滲透性發(fā)生變化，同時部分菌體會產(chǎn)生自溶，然后用丙酮、丁醇或緩沖液等溶劑處理時,胞內(nèi)物質(zhì)就會被抽提出來。
干燥法的操作可分空氣干燥、真空干燥、噴霧干燥和冷凍干燥等。酵母菌常用空氣干燥,在25~30℃的熱空氣流中吹干,部分酵母產(chǎn)生自溶,再用水,緩沖液或其他溶劑抽提時，效果就較好。真空干燥適用于細菌，把干燥成塊的菌體磨碎再進行抽提。冷凍干燥適用于制備不穩(wěn)定的生化物質(zhì)，在冷凍條件下磨成粉，再用緩沖液抽提。
四，各種破碎方法的優(yōu)劣和選擇依據(jù)
由上述可見，細胞破碎的方法很多,但是它們的破碎效率和適用范圍不同。其中許多方法僅適用于實驗室和小規(guī)模的破碎,迄今為止,能適用于工業(yè)化的大規(guī)模破碎方法還很少，由于高壓勻漿和珠磨兩種機械破碎方法，處理量大,速度非常快，目前在工業(yè)生產(chǎn)上應(yīng)用最廣泛。
在機械法破碎過程中,由于消耗機械能而產(chǎn)生大量的熱量,使料液溫度升高,而易造成生化物質(zhì)的破壞，這是機械法破碎中存在的共同問題，因此，在大多數(shù)情況下都要采取冷卻措施，對于較小的設(shè)備,可采用冷卻夾套或直接投入冰塊冷卻，但是在大型設(shè)備中熱量的除去是必須考慮的一個主要問題。特別在超聲波處理時，熱量的驅(qū)散不太容易,很容易引起介質(zhì)溫度的迅速上升,這就限制了它的放大使用，因為要輸入很高的能來提供必要的冷卻,在經(jīng)濟上是不合算的。因此，超聲波振蕩法主要適用于實驗室或小規(guī)模的細胞破碎。
非機械法中的化學法和酶法應(yīng)用最廣泛。采用化學法時，特別應(yīng)注意的問題是所選擇的溶劑(酸、堿、表面活性劑和有機溶劑等)對生化物質(zhì)不能具有損害作用,在操作后，還必須采用常規(guī)的分離手段，從產(chǎn)物中除去這些試劑,以保證產(chǎn)品的純凈。酶解法的優(yōu)點是專一性強,發(fā)生酶解的條件溫和，采用該法時必須選擇好特定的酶和適宜的操作條件。由于溶菌酶價格較高，一般僅適用于小規(guī)模應(yīng)用。但是對于酵母細胞壁的破碎，已有應(yīng)用于工業(yè)規(guī)模的報道。自溶法價格較低,在一定程度上能用于工業(yè)規(guī)模,但是，對不穩(wěn)定的微生物容易引起所需蛋白質(zhì)的變性，自溶后的細胞培養(yǎng)液過濾速度也會降低。抑制細胞壁合成的方法由于要加入抗生素，費用也很高。
滲透壓沖擊和凍結(jié)-融解法都屬于較溫和的方法，但破碎作用較弱，它們只適用于細胞壁較脆弱的微生物菌體或者細胞壁合成受抑制、強度減弱了的微生物，它們常與酶解法結(jié)合起來使用，提高破碎效果。
干燥法屬于較劇烈的一種破碎方法，容易引起蛋白質(zhì)或其他組分變性，當提取不穩(wěn)定的生化物質(zhì)時，常加入一些試劑進行保護,如可加入少量還原劑半胱氨酸、硫基乙醇、亞硫酸鈉等。
選擇破碎方法時,需要考慮下列因素:細胞的數(shù)量和細胞壁的強度;產(chǎn)物對破碎條件(溫度、化學試劑、酶等)的敏感性;要達到的破碎程度及破碎所必要的速度等，具有大規(guī)模應(yīng)用潛力的生化產(chǎn)品應(yīng)選擇適合于放大的破碎技術(shù)。同時還應(yīng)把破碎條件和后面的提取步驟結(jié)合起來考慮。在固-液分離中，細胞碎片的大小是重要因素，太小的碎片很難分離除去，因此,破碎時既要獲得高的產(chǎn)物釋放率又不能使細胞碎片太小,如果在碎片很小的情況下才能獲得高的產(chǎn)物釋放率,這種操作條件仍不是合適的,適宜的細胞破碎條件應(yīng)該從高的產(chǎn)物釋放率、低的能耗和便于后步提取這三方面進行權(quán)衡。
來源：Internet
