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嘉峪檢測網 2025-01-18 16:26
色譜新手:請問我做一種藥的分析查美國藥典規定使用100mm×40mm8μm的色譜柱流速3mLmin可現在市場上已不容易找到這種規格的產品于是我按USP中色譜柱比較的數據庫的指引選了一款選擇性一致的等價色譜柱其規格是100mm×46mm3μm的色譜柱當選用3mLmin的流速時發現柱壓超高,請問我如何對方法進行調整以滿足USP的要求?
老手解答:流速調整原則是流動相通過柱子的線速度一致,等價柱的截面積大了,流速也應增加才能保持相同的線速度。新流速計算結果是:(4.6/4.0)2x3.0=4.0ml/min。但3ml/min流速都已導致柱壓太高,4.0ml/min明顯不行。好在USP還有個允許±50%的流速調整指導原則,這樣將流速調至2.0ml/min既符合USP規定,又能使柱壓降到可接受的范圍,但這種改變不能引起其它不好后果。
這個例子中,等度分析中,流速改變會引起塔板數和峰寬的改變,但不會影響峰的選擇性。3um粒徑色譜柱柱效比8um的高很多,可考慮縮短柱長以補償或部分補償流速降低造成的測定時間增加。所以,更佳選擇是50 mm ×4.6 mm, 3μm的柱子,2.0ml/min的流速運行,可以在符合USP規定的情況下,又得到更快速的測定分離。
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